[发明专利]一种检测水稻香味基因fgr和红米基因Rc的多重PCR方法

权利要求书

1.一种检测水稻香味基因fgr和红米基因Rc的多重PCR方法，其特征在于：

利用PCR反应体系中，同时加入香味基因fgr和红米基因Rc的两对特异引物，并对dNTPs浓度及引物浓度进行优化，在55.5℃的退火温度，扩增出清晰的带型。

2.根据权利要求1所述一种检测水稻香味基因fgr和红米基因Rc的多重PCR方法，其特征在于：所述的香味基因fgr的特异引物如下所示：

正向引物ff序列（5'-3'）为GGAGCTTGCTGATGTGTGTAAA，

反向引物fr序列（5'-3'）为GGAAACAAACCTTAACCATAG；

所述引物ff/fr扩增获得的DNA片段长度267bp为香味，DNA片段长度275bp为非香；该引物可以有效鉴定水稻第8染色体上香味基因fgr中第7外显子是否有8bp区段的缺失；

所述的水稻红米基因Rc的特异引物如下所示：

正向引物Rf序列（5'-3'）为CAGGCACCACACAGAGAATG，

反向引物Rr序列（5'-3'）为CTCCTCTCTTTCAGCACATGG；

所述引物Rf/Rr扩增获得的DNA片段长度161bp为白米，DNA片段长度175bp为红米；该引物可以有效鉴定水稻第7染色体上红米基因Rc中第6外显子是否有14bp区段的缺失。

3.根据权利要求1所述一种检测水稻香味基因fgr和红米基因Rc的多重PCR方法，其特征在于：所述的dNTPs浓度，在20μl体系中的each2.5mMdNTPs浓度最适用量为0.8μl。

4.根据权利要求1或2所述一种检测水稻香味基因fgr和红米基因Rc的多重PCR方法，其特征在于：所述的引物浓度，引物ff/fr终浓度为0.1μM，引物Rf/Rr终浓度为0.07μM。