[发明专利]一种含自体外周血内皮祖细胞的医学美容产品

说明书

本发明提供了一种含自体外周血内皮祖细胞的医学美容产品的制备方法，其中，所述方法包括通过从自体外周血中获取富含血小板血浆和培养获得自体内皮祖细胞，将获取的自体内皮祖细胞加入到自体血浆中制备成生物美容制剂，自体血浆促使内皮祖细胞分化为内皮细胞形成血管。同时提供了由自体内皮祖细胞和自体血浆制备成医学美容产品，可用于皮肤暗斑、粉刺瘢痕以及烧伤、外伤引起的疤痕等修复改善。

技术领域

本发明涉及一种制备自体外周血内皮祖细胞的方法以及通过所述方法获得的含自体外周血内皮祖细胞的医学美容产品。特别地，本发明涉及采用自体外周血来源的富含血小板血浆和内皮祖细胞，将获取的自体内皮祖细胞加入到富含血小板血浆中制备成生物美容制剂，富含血小板血浆促使内皮祖细胞分化为内皮细胞形成血管。同时提供了由自体内皮祖细胞和自体血浆制备成医学美容产品，可用于皮肤暗斑、粉刺瘢痕，以及烧伤、外伤引起的疤痕等修复改善。

背景技术

目前，市场上已经出现一些活细胞医学美容产品，但这些活细胞来源多数为同源异体的。尽管皮肤免疫反应低下，但是作为异体的活细胞应用到皮肤上，还是容易发生过敏反应，所以需要在应用前进行皮试，观察两个小时以上，无过敏反应方可应用。

内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells，EPCs)是血管内皮细胞的前体细胞，在生理或病理因素刺激下，可从骨髓动员到外周血参与损伤血管的修复。内皮祖细胞主要来源骨髓，但骨髓采集需要麻醉且较痛苦，存在创伤，不易为人们接受。在人循环血液中已经证明存在内皮祖细胞，可以分化成内皮细胞和/或平滑肌细胞，其主要功能是参与血管新生。表皮和真皮层细胞之所以能使得皮肤保持活力，主要是因为皮肤中毛细血管提供了足够的养分，促使细胞不断增殖、分裂和分化，新生细胞增多，使皮肤增厚，逐渐恢复皮肤正常结构和生理功能。

本发明利用外周血内皮祖细胞及其血管生成的功能，配合富含血小板血浆中大量细胞因子和营养成分，有效令内皮祖细胞分化为内皮细胞和平 滑肌细胞，应用到皮肤中形成新生血管，保持皮肤丰富的营养成分，促使细胞不断增殖、分裂和分化。特别是，对于皮肤暗斑、粉刺瘢痕，以及烧伤、外伤引起的疤痕等，具有良好修复作用。

发明内容

为了促使皮肤新生细胞增多，使皮肤增厚，逐渐恢复皮肤正常结构和生理功能，本发明利用自体外周血来源富含血小板血浆和内皮祖细胞的生物学作用，可以有效地促使内皮祖细胞分化为内皮细胞和平滑肌细胞，形成新生毛细血管，为皮肤供应充足养分。本发明通过采集抗凝外周血获得自体血浆，抗凝外周血来源单核细胞培养获得内皮祖细胞。自体血浆富含血小板和富含各种生长因子，其中成纤维细胞生长因子：激发新活细胞，加速组织修复；表皮生长因子：修复上皮细胞，加速血管生长，加快组织修复；转化生长因子：促进血管上皮细胞修复再生；血小板衍生生长因子：产生胶原蛋白，促进血管生长，激活细胞再生；血管内皮生长因子：强力修复组织，产生胶原蛋白，刺激产生透明质酸。

本发明中内皮祖细胞存在骨髓和外周血中，加速新生血管的形成，完善组织的血液循环，改善组织的血供，最终达到防止组织缺血坏死。内皮祖细胞可以直接作用于终末血管，增加皮瓣局部毛细血管及小静脉的数量和总面积，以增加皮片及随意皮瓣的成活面积。烧伤、外伤等引起的疤痕，内皮祖细胞可以加速创伤愈合的速度，减少瘢痕增生的发生，促进脂肪细胞增殖和存活。内皮祖细胞通过对血管内皮细胞的作用，促进皮肤组织不断形成新的毛细血管，供应充足营养，使得成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞等不断增殖、分裂和分化，新生细胞增多，使皮肤增厚，逐渐恢复皮肤正常结构和生理功能。

本发明提供了一种含自体外周血内皮祖细胞的医学美容产品的制备方法，其中，所述方法包括通过从自体外周血中获取富含血小板血浆和培养获得自体内皮祖细胞，将获取的自体内皮祖细胞加入到自体血浆中制备成生物美容制剂。

所述自体内皮祖细胞高表达其特异性标志物；所述自体内皮祖细胞高表达CD34、CD133和FLK-1分子；所述自体内皮祖细胞高表达CD34+≥90％、CD133+≥90％和FLK-1+≥80％。