[发明专利]人巨细胞病毒交联抗体及其在免疫检测试剂盒中的应用

说明书

本申请是申请号为201310267573.6、申请日2013年6月28日的中国专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及一种异源交联物，具体而言就是一种由两种异源的抗体通过交联反应而获得的含有四聚体形式的异源交联抗体的异源交联物，及其在病人阳性血液中病原体抗体替代物上的应用，属于免疫学技术领域。

背景技术

如今，诸如病毒、细菌、真菌和寄生虫之类的病原体给人类带来的威胁越来越大。基于抗原和抗体之间特异性和高灵敏性反应的免疫分析方法，如胶体金免疫层析检测、乳胶免疫层析检测、放射免疫检测(RIA)、酶联免疫吸附检测(ELISA)、时间分辨荧光免疫检测(TRFIA)或化学发光免疫检测(CLIA)，已经被广泛地用于临床免疫测试之中。这些免疫分析方法通常被用来定性或定量地检测人血液中的病原体抗原或抗体，从而快速和准确地确定感染是否发生和/或感染所处的阶段。

临床免疫检测试剂盒一般都包括阴性质控品和阳性质控品。这些质控品往往来自抗体效价较高的病人阳性血液的系列稀释品，或者直接使用不同抗体效价的病人阳性血液，包括血清、血浆或全血。但是利用病人阳性血液制备阳性质控品有很多缺点：1)很难获得同时具有高效价和高特异性的病人阳性血液；2)个体之间的抗体效价和特异性差异较大，难以标准化；3)成本比较高，4)有些病原体感染病例稀缺，在短时间内很难获得足够的阳性血液；5)病原体阳性血液具有潜在的传染性，即便经过灭活处理，但仍然难以保证彻底灭活，同时在收集和灭活病人阳性血液时，操作人员也有潜在被感染的风险。为此，人们经常使用替代病人阳性血液的质控品。

欧洲专利申请EP 0 330 902A2揭示出在检测人血液特异性抗体时，使用一种或多种人单克隆抗体(如人抗风疹病毒单克隆抗体和人抗水痘带状疱疹病毒单克隆抗体)作为测试对照，但是每次构建的人单克隆抗体只包括一种抗体的恒定区，检测其他抗体类型需要重新构建，而且由于在伦理上不允许利用人体进行抗体制备，因而不得不利用噬菌体展示技术和转基因动物等方法来制造人单克隆抗体，这就使得抗体制备比较困难。美国专利US 6,015,662揭示出人鼠嵌合抗体可以用于人血液抗体检测的阳性对照，但是每次构建的人鼠嵌合单克隆抗体只包括一种抗体的恒定区，检测其他抗体类型需要重新构建，而且工艺非常复杂，这是因为除了利用杂交瘤技术获得小鼠单克隆抗体之外，还要进行抗体基因克隆以及人鼠嵌合基因的构建和表达。