[发明专利]一种土壤线虫分离提取的装置及方法有效
申请号: | 201510019727.9 | 申请日: | 2015-01-15 |
公开(公告)号: | CN104568563B | 公开(公告)日: | 2018-03-13 |
发明(设计)人: | 耿玉清;刘敏;姜宁;杨雨果 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | G01N1/34 | 分类号: | G01N1/34;B07B9/00 |
代理公司: | 北京尚德技研知识产权代理事务所(普通合伙)11378 | 代理人: | 严勇刚 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 土壤 线虫 分离 提取 装置 方法 | ||
1.一种土壤线虫分离提取的装置,包括支架、盛土杯、搅拌器、分离筛、喷水系统、收集容器,其特征在于:
所述盛土杯是一个底部起码具有一出液口的杯子,所述出液口上连接一导流管,导流管上设置一旋塞阀;
所述搅拌器置于所述盛土杯中;
所述分离筛包括第一级分离筛和第二级分离筛,第一级分离筛为水平或倾斜放置,第二级分离筛则为倾斜放置,在第二级分离筛的低端处设置有引液口,引液口下面连接收集管,收集管下方连接收集容器;第一级分离筛为40目,第二级分离筛为400目;
所述第一级分离筛和所述第二级分离筛包括筛底和筛壁两部分,筛壁是沿筛底边缘自然向上衔接而成,筛底与筛壁衔接的地方形成圆弧形过渡;
所述喷水系统包括喷水管,所述喷水管的出水沿所述第二级分离筛筛壁由高端向低端处冲刷;
所述第二级分离筛筛壁带有挡水板,所述挡水板是由筛壁沿着上沿水平向筛子内侧折,然后再竖直向下折而形成的;
所述挡水板在第二级分离筛里侧形成一整圈或者半圈,当为半圈时位于倾斜的所述第二级分离筛的高端处;
所述喷水管包括上部喷水管,当所述挡水板为一整圈时,所述上部喷水管成一整圈,对应地绑在所述挡水板与筛壁之间的区域内,当所述挡水板为半圈时,所述上部喷水管成半圈,对应地绑在所述挡水板与筛壁之间的区域内,所述上部喷水管上带有出水孔,出水沿着筛壁内侧向下流;
当所述挡水板和所述上部喷水管为半圈时,所述喷水管还包括下部喷水管,所述下部喷水管成整圈绑在所述第二级分离筛筛壁的底部,所述下部喷水管上带有出水孔,出水方向朝向筛子内侧;
所述上部喷水管捆绑在距离第二级分离筛筛壁上沿往下1cm处,且此处高度小于所述挡水板的高度;所述下部喷水管捆绑在距离第二级分离筛筛底往上1cm处;
所述上部喷水管和所述下部喷水管内径为5mm,在管子上分散性的设置有若干个出水孔。
2.根据权利要求1所述的土壤线虫分离提取的装置,其特征在于:所述盛土杯为一底部呈渐缩形的杯体,所述出液口设置于渐缩形的底部。
3.根据权利要求1所述的土壤线虫分离提取的装置,其特征在于:所述搅拌器包括旋转轴和搅拌轮,搅拌轮是由几片呈辐射状环周固定在旋转轴上的叶片组成,每片叶片与水平面成一定角度倾斜,每叶片的形状为平面体或螺旋状曲面体。
4.根据权利要求1所述的土壤线虫分离提取的装置,其特征在于:所述上部喷水管绑在所述筛壁上,或绑在所述挡水板上。
5.根据权利要求1所述的土壤线虫分离提取的装置,其特征在于:所述第一级分离筛和第二级分离筛都为倾斜放置的情况下,倾斜方向相反,且所述第二级分离筛倾斜角度大于所述第一级分离筛。
6.一种根据权利要求1~5之一所述土壤线虫分离提取的装置采取的分离提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)首先对供试鲜土进行简单处理,移出肉眼可见的杂物;
2)称取100g的供试鲜土放入到盛土杯中,加入400ml的蒸馏水或自来水,启动搅拌器,以50~100转/分钟的速度,搅拌5分钟;
3)打开盛土杯上的旋塞阀,打开所述收集管,使盛土杯中的土液流出,穿越下面的第一级分离筛和第二级分离筛,从收集管流出,进入收集容器;
4)在土液积累到第二级分离筛上面时,用玻璃棒轻轻搅拌,同时打开加水设备,向喷水管加水,使水冲刷筛壁和筛底,使土液向引液口方向流动;
5)检查盛土杯中土液的残留,用少量水冲洗,直至盛土杯中无土液残留,第一级分离筛筛下的土液澄清为止,然后关闭旋塞阀;
6)不断用加水设备通过向喷水管加水,冲洗积累在第二级分离筛上面的土液;观察透过第二级分离筛的土液,直至透过分离筛的土液澄清为止;
7)收集容器收集到线虫悬液,经过沉淀,去除上层清液后转移到离心管中,把收集容器用水冲洗干净,将悬液进行离心,2000~3000转/每分钟,然后再去除上清液;
8)在离心管中加入800g/L蔗糖溶液,在2000转/分钟速度下离心2分钟,将上清液注进500目的筛子进行过筛,并用水冲洗筛子即可获取干净的线虫。
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