[发明专利]一种从牛乳清中分离乳过氧化物酶的方法有效
| 申请号： | 201510019875.0 | 申请日： | 2015-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN104593340B | 公开（公告）日： | 2017-12-08 |
| 发明（设计）人： | 贠军贤;潘毛毛;姚善泾;林东强;张颂红;陈良;代斌 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/08 | 分类号： | C12N9/08 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙)33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 310014 浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 牛乳 分离 过氧化物 方法 | ||
1.一种从牛乳清中分离乳过氧化物酶的方法，其特征在于取直径10mm、高38mm、内嵌纤维素晶胶微球、带磺酸基功能基团的聚甲基丙烯酸羟乙酯阳离子交换嵌合型晶胶介质床柱，纤维素晶胶微球的平均粒径为900μm，占晶胶基质骨架的质量比为25%，晶胶介质床柱的有效孔隙率为83%，最大孔隙率为94%，孔径为0.1～300μm，对溶菌酶模型蛋白的饱和吸附容量5 mg/mL，以10mM、pH为6 的Na2HPO4/NaH2PO4溶液为缓冲溶液，用45 mL缓冲溶液对该阳离子交换嵌合型晶胶床柱进行平衡；取4 mL 乳清，用缓冲溶液稀释4倍，以0.5 cm/min流速上样，然后用缓冲溶液冲洗除去未吸附的杂质，分别用0.05、0.5、2 M的NaCl洗脱液进行分步洗脱，收集目标洗脱峰，经脱盐和冷冻干燥，得到乳过氧化物酶。
2.一种从牛乳清中分离乳过氧化物酶的方法，其特征在于取直径10 mm、高52 mm、内嵌纤维素晶胶微球、带磺酸基功能基团的聚甲基丙烯酸羟乙酯阳离子交换嵌合型晶胶介质床柱，纤维素晶胶微球的平均粒径为900 μm，占晶胶基质骨架的质量比为30%，晶胶介质床柱的有效孔隙率为80%，最大孔隙率为94%，孔径为0.1～300μm，对溶菌酶模型蛋白的吸附容量3.4 mg/mL，用50 mL、10 mM、 pH为5.8的Na2HPO4/NaH2PO4溶液为缓冲溶液，对阳离子交换嵌合型晶胶床柱进行平衡；取5.2 mL 乳清，用缓冲溶液稀释3倍，以1 cm/min流速上样，然后用缓冲溶液冲洗除去未吸附的杂质，分别用0.075、0.15、1和2 M的NaCl洗脱液进行分步洗脱，收集目标洗脱峰，经脱盐和冷冻干燥，得到乳过氧化物酶。
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