[发明专利]一种珍珠蛋白的制备方法及该方法制备得到的水溶性珍珠蛋白和酸溶性珍珠蛋白在审
申请号: | 201510020372.5 | 申请日: | 2015-01-15 |
公开(公告)号: | CN104558137A | 公开(公告)日: | 2015-04-29 |
发明(设计)人: | 杨安全;王菁;张丽华 | 申请(专利权)人: | 浙江欧诗漫生物股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C07K1/14 |
代理公司: | 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 | 代理人: | 王从友 |
地址: | 313200 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 珍珠 蛋白 制备 方法 得到 水溶性 酸溶性 | ||
1.一种珍珠蛋白的制备方法,其特征在于该方法包括以下的步骤:
1)将珍珠研磨成纳米级珍珠粉;
2)用去离子水浴纳米珍珠粉超高压均质,40~80℃下均质0.2~1h,低温0~8℃离心获取水溶性珍珠提取物a和沉淀,并将沉淀用乙醇溶液清洗2~4遍;
3)以上获得的沉淀用弱酸在30~50℃温度下真空溶解,低速搅拌80-120rpm下反应0.5~3h;低温0~8℃离心取上清液,为酸溶性珍珠提取物b;
4)将水溶性珍珠提取物a和酸溶性珍珠提取物b分别进行脱盐;
5)脱盐之后将水溶性珍珠提取物a和酸溶性珍珠提取物b冻干,分别获得水溶性珍珠蛋白和酸溶性珍珠蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种珍珠蛋白的制备方法,其特征在于纳米级珍珠粉的粒度为10~100nm。
3.根据权利要求1所述的一种珍珠蛋白的制备方法,其特征在于弱酸采用食用醋酸、柠檬酸或碳酸。
4.根据权利要求1所述的一种珍珠蛋白的制备方法,其特征在于脱盐采用透析脱盐:2~10℃环境下用3000~5000Da分子量的透析袋透析3~5天除盐,1体积的样品对应10~20体积的蒸馏水,每天换水1~2次。
5.根据权利要求1所述的一种珍珠蛋白的制备方法,其特征在于脱盐采用层析脱盐:用葡聚糖凝胶 G-15装柱,首次脱盐加样后即开始收集,每1~2分钟收集一次,收集多份样品,分别加入少量硫酸铵,检测是否有沉淀,验证从第几份样品开始有盐析出,收集这个时间点之前的溶液即为脱盐之后的蛋白溶液。
6.根据权利要求1~5任意一项权利要求所述的方法制备的水溶性珍珠蛋白,该水溶性珍珠蛋白的主要分子量分布为小于15kd。
7.根据权利要求1~5任意一项权利要求所述的方法制备的酸溶性珍珠蛋白,该酸溶性珍珠蛋白的主要分子量分布为14kd~50kd。
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