[发明专利]高纯度含PTH冷冻干燥制剂及其制造方法

权利要求书

1.一种含PTH肽冷冻干燥制剂的检査方法，该方法的特征在于，对于该含PTH肽冷冻干燥制剂中的下述PTH类似物1’～6’以及9’～11’的存在进行确认、和/或对存在量进行定量：

1)类似物1’：

所述PTH肽的氧化物，其中，与人PTH(1-34)的8位和18位甲硫氨酸对应的残基变化为甲硫氨酸亚砜残基、并且与23位色氨酸对应的残基变化为下述结构式(a)所表示的残基；

[化1]

2)类似物2’：

所述PTH肽的氧化物，其中，与人PTH(1-34)的8位和18位甲硫氨酸对应的残基变化为甲硫氨酸亚砜残基、并且与23位色氨酸对应的残基变化为下述结构式(b)所表示的残基；

[化2]

3)类似物3’：

所述PTH肽的氧化物，其中，与人PTH(1-34)的8位和18位甲硫氨酸对应的残基变化为甲硫氨酸亚砜残基；

4)类似物4’：

所述PTH肽的氧化物，其中，与人PTH(1-34)的8位甲硫氨酸对应的残基变化为甲硫氨酸亚砜残基、并且与23位色氨酸对应的残基变化为所述结构式(a)所表示的残基；

5)类似物5’：

所述PTH肽的氧化物，其中，与人PTH(1-34)的18位甲硫氨酸对应的残基变化为甲硫氨酸亚砜残基、并且与23位色氨酸对应的残基变化为所述结构式(a)所表示的残基；

6)类似物6’：

所述PTH肽的氧化物，其中，与人PTH(1-34)的18位甲硫氨酸对应的残基变化为甲硫氨酸亚砜残基、并且与23位色氨酸对应的残基变化为所述结构(b)所表示的残基；

9)类似物9’：

所述PTH肽的氧化物，其中，与人PTH(1-34)的23位色氨酸对应的残基变化为所述结构式(a)所表示的残基；

10)类似物10’：

所述PTH肽的氧化物，其中，与人PTH(1-34)的23位色氨酸对应的残基变化为下述结构式(c)-1或(c)-2所表示的色氨酸单氧化物残基；

[化3]

或者

11)类似物11’：

所述PTH肽的氧化物，其中，与人PTH(1-34)的23位色氨酸对应的残基变化为所述结构式(b)所表示的残基，

其中，所述PTH类似物的定量包括：对来自含PTH肽冷冻干燥制剂的试样在如下测定条件下进行高效液相色谱，计算出测定紫外部吸收时的色谱图上的相当于所述PTH类似物的峰面积，

测定条件：

检测器：紫外吸光光度计，测定波长：214nm；

柱：在内径4.6mm、长度150mm的不锈钢管中填充粒径3.5μm的液相色谱法用十八烷基甲硅烷基化硅胶；

柱温度：40℃；

移动相A：pH2.3的0.2M硫酸缓冲液/乙腈的体积比＝9/1；

移动相B：pH2.3的0.2M硫酸缓冲液/乙腈的体积比＝1/1；

移动相的送液：如下表1改变移动相A和移动相B的混合比进行浓度梯度控制

表1：浓度梯度控制

流量：每分钟1.0mL

检出时间：试样溶液注入后45分钟。

2.如权利要求1所述的方法，其包括：对于来自含PTH肽冷冻干燥制剂的试样，利用高效液相色谱测定紫外部吸收，通过对此时色谱图上的相当于所述PTH类似物的峰面积、与同一色谱图上的相当于PTH肽的峰面积或PTH肽的峰面积与除此以外检测出的全部PTH类似物的峰面积之和进行比较，从而计算出该含PTH肽冷冻干燥制剂中的PTH肽的纯度。

3.如权利要求2所述的方法，其中，在所述色谱图上应用以1个或2个以上的单一峰的形式检测出所述PTH类似物的任意2种以上的层析条件的情况下，通过将该峰的面积、与同一色谱图上相当于PTH肽的峰面积或PTH肽的峰面积与除此以外检测出的全部PTH类似物的峰面积之和进行比较，从而计算出该含PTH肽冷冻干燥制剂中的PTH肽的纯度。

4.如权利要求1所述的方法，其进一步包括：使用高效液相色谱质量分析仪对所述PTH类似物的质量数进行检测。