[发明专利]一种螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物及其制备与应用有效
申请号: | 201510024450.9 | 申请日: | 2015-01-16 |
公开(公告)号: | CN104548126B | 公开(公告)日: | 2017-08-25 |
发明(设计)人: | 张黎明;麦开锦;李小军;何杨华 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | A61K47/69 | 分类号: | A61K47/69;A61K47/61;A61K41/00;A61K48/00;A61P35/00 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司44245 | 代理人: | 裘晖 |
地址: | 510275 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 螺旋 多糖 衍生物 负载 单壁碳 纳米 核酸 复合物 及其 制备 应用 | ||
1.一种螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物的制备方法,其特征在于包括以下制备步骤:
(1)将直链淀粉溶解于二甲基亚砜中,在惰性气体保护下,加入N,N’-羰基二咪唑,在20~40℃温度下搅拌反应1~6小时,然后往体系中滴加乙二胺,继续搅拌反应11~66小时后用水透析,冷冻干燥后得到含伯氨基团的水溶性直链淀粉衍生物;
(2)将步骤(1)制备的含伯氨基团的水溶性直链淀粉衍生物溶于水配制成0.1~5mg/mL的溶液,加入单壁碳纳米管,然后在冰水浴中进行超声处理,将得到的混合体系进行离心、微孔滤膜过滤,滤渣经水洗后冷冻干燥,得到直链淀粉衍生物-单壁碳纳米管包合物;
(3)将步骤(2)得到的直链淀粉衍生物-单壁碳纳米管包合物分散在双蒸水中,配制成0.01~1mg/mL的分散液;接着加入核酸,充分振荡后置于水浴中孵育,得到螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物;
所述的N,N’-羰基二咪唑与直链淀粉的质量比为(0.1~6):1;乙二胺与N,N’-羰基二咪唑的摩尔比为(2~20):1;
步骤(2)中所述的单壁碳纳米管是指长度为0.5~10μm,直径为1~5nm的单壁碳纳米管;单壁碳纳米管与直链淀粉衍生物的质量比为(0.1~2):1。
2.根据权利要求1所述的一种螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述的直链淀粉是指经过纯化处理的马铃薯、玉米或者小麦直链淀粉;所述纯化处理步骤为:将直链淀粉溶于二甲基亚砜中,所得溶液抽滤除去不溶杂质,将滤液逐滴加入到搅拌中的甲醇或乙醇进行沉淀,沉淀物重复溶解、抽滤和沉淀操作2~4次后将沉淀物真空干燥,得到纯化的直链淀粉。
3.根据权利要求1所述的一种螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物的制备方法,其特征在于:所述的二甲基亚砜在使用前通过以下方法纯化:在二甲基亚砜中加入氢化钙,室温搅拌2~7天去除水分,减压蒸馏,收集的馏出液备用;所述惰性气体是指氮气或氩气。
4.根据权利要求1所述的一种螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物的制备方法,其特征在于:所述的用水透析是指用截流分子量为1000~30000的透析袋,在去离子水或蒸馏水中透析1~7天。
5.根据权利要求1所述的一种螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物的制备方法,其特征在于:所述的超声处理是指在频率为20~65kHz条件下超声处理1~6个周期;所述的周期是指每隔1~30min超声处理5~60min;所述的离心是指在转速为500~3000rpm的条件下离心1~5min;所述的微孔滤膜是指孔径为100~500nm的水系或有机系微孔滤膜。
6.根据权利要求1所述的一种螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物的制备方法,其特征在于:步骤(3)中所述的核酸是指pDNA或siRNA;所述的置于水浴中孵育是指置于35~40℃水浴中孵育10~60min。
7.一种螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物,其特征在于:通过权利要求1~6任一项所述的方法制备得到。
8.权利要求7所述的螺旋链多糖衍生物共负载单壁碳纳米管和核酸的复合物在制备光热-基因联合治疗药物领域中的应用。
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