[发明专利]一种酶促化学发光试剂组合物

说明书

技术领域

本发明属于酶免疫检测领域，涉及一种化学发光试剂，具体来说，涉及一种酶促化学发光试剂组合物。

背景技术

    AMPPD作为国际公认的第三代化学发光底物，现在已有成熟稳定的配方，该配方试剂已经广泛地应用于大型自动化免疫分析仪上。然而， AMPPD底物与碱性磷酸酶在室温下反应发光比较缓慢，通常需要在37℃的条件下，反应1小时才能达到最大值。因此，该配方试剂在应用上受到一些限制。AMPPD（化学发光底物I）具有如下结构：

。该AMPPD化学发光反应的中间体为中间体1，其结构为：

。

新一代的酶促化学发光底物CPD Star （化学发光底物II）具有如下结构：

。其化学发光反应的中间体具有如下结构：

。对比上述AMPPD与CPD Star的分子结构可以看出，由于CPD Star分子中多两个氯原子，它们具有拉电子的效应，当底物与酶反应脱去磷酸基后，其中间体2能比AMPPD的中间体1更快速分解，使底物CPD Star具有更快的反应速率和更高的发光强度。

虽然已知CPD Star具有比AMPPD更快的发光速度和更高的发光强度，目前已经也将其开始应用于自动化酶免疫分析仪上。但目前所使用的产品主要是用添加增强剂的配方技术，而没有发挥这个新颖化学发光底物的最佳性能。

因此，亟需开发一种化学发光试剂组合物，以充分发挥CPD Star作为发光底物的最佳性能。

发明内容

本发明的目的是通过能量转移的方法，提出一种与传统增强剂配方完全不同的配方技术，充分发挥CPD Star作为发光底物的最佳性能。

为达到上述目的，本发明提供了一种酶促化学发光试剂组合物，该组合物包含酶促化学发光底物II、长链季盐表面活性剂及荧光表面活性剂，该酶促化学发光底物II具有如下的结构：

。

上述的组合物，其中，所述的长链季盐表面活性剂具有如下的通式：

；

其中，R₁、R₂ 和 R₃ 为C1-10的烷基或苄基中的任意一种，R₁、R₂ 和 R₃相同或不同；X^-为氟、氯、溴、碘或甲磺酸根；Z为氮或磷原子。

上述的组合物，其中，所述的季盐表面活性剂通式中的R₁、R₂ 和 R₃ 为甲基、乙基、丙基或苄基中的任意一种。

上述的组合物，其中，所述的荧光表面活性剂具有如下的通式：

。

上述的组合物，其中，所述的荧光表面活性剂具有如下的通式：

。

上述的组合物，其中，所述的荧光表面活性剂具有如下的通式：

。

上述的组合物，其中，所述的荧光表面活性剂具有如下的通式：

。

上述的组合物，其中，所述的组合物还包含pH为8-11的磷酸缓冲液，化学发光底物的浓度为0.01-20毫摩尔/升。

上述的组合物，其中，还包含镁盐，其中，镁盐的浓度为0.1-20毫摩尔/升，所述的长链季盐表面活性剂的浓度为0.1-50毫摩尔/升，所述的荧光表面活性剂的浓度为0.05-20毫摩尔/升。

上述的组合物，其中，所述的组合物中，所述的镁盐包含醋酸镁、氯化镁或溴化镁。

在酶免疫检测方法中，一个高灵敏、低噪声的检测试剂是非常重要的组成部分。本发明提供了一种新颖的化学发光试剂组合物，应用于酶免疫检测，其具有酶免疫检测所需的低噪音和高灵敏度的特点，可广泛应用于大型自动化酶免疫分析仪。本发明的化学发光试剂组合物具有如下优点：（1）底物用量减少到原传统配方用量的十分之一。（2）检测波长范围变窄，即为530~540 纳米之间，避免了传统化学发光所发出的460~470纳米波长光的干扰，大大降低了检测噪音，提高了检测信噪比。因此，本发明的化学发光试剂比传统的化学发光试剂具有更优异的性能。

附图说明

图1为本发明的酶促化学发光试剂组合物用于酶免疫检测原理图。

图 2 为本发明的实施例具体使用的一个表面活性剂的结构式。

图 3为本发明的实施例具体使用的 一个荧光表面活性剂的结构式。 

具体实施方式