[发明专利]CyHV‑2单克隆抗体、杂交瘤细胞和应用

说明书

技术领域

本申请涉及单克隆抗体领域，特别是涉及用于CyHV-2的单克隆抗体，分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞，以及该单克隆抗体的应用。

背景技术

鲤科疱疹病毒-2(cyprinid herpesvirus 2，简写CyHV-2)是疱疹病毒性造血器官坏死病的病原，能引起养殖的金鱼、鲫鱼大量死亡。2011～2012年，在我国中部地区的养殖鲫鱼暴发了该病，造成了极高的死亡率(Wang等，2012)。2011年，我国出口马来西亚的金鱼被通报检出CyHV-2，同年江苏省暴发鲫鱼大量死亡，深圳局动植中心水生室派人采样后，通过分子生物学方法检测到CyHV-2，并且通过电镜检测成功在脾脏和肾脏中观察到了该病毒颗粒。可见，疱疹病毒性造血器官坏死病已经传入我国，并已对我国金鱼养殖业及金鱼出口贸易造成了严重的影响。目前，新加坡、马来西亚等国家明确要求对进口到国内的金鱼要求出具金鱼造血器官坏死病的健康证书。因此加强对该病的研究，对于我国鲤科鱼类养殖业和进出口贸易的健康发展具有重要意义。

目前对CyHV-2的检测鉴定主要包括细胞培养分离技术、分子检测和电镜观察。细胞培养分离技术是最准确的诊断方法，但是，研究发现CyHV-2很难在鱼类病毒分离常用的细胞系中进行增殖。分子检测方面，特别是PCR法是目前较为精确检测CyHV-2感染的方法，因为它可以检测到组织中极微量的病毒DNA；但分子检测需要变温PCR扩增仪器，为现场的快速诊断带来了不便。电镜观察是最直接的方法，但是，同样的需要特殊的检测设备，并且也不便于现场快速诊断检测。

现有的对金鱼疱疹病毒性造血器官坏死病的检测方法主要是PCR、组织病理学等方法，检测方法相对单一；而免疫学研究相对缺乏或滞后，尚无用于该病的免疫学检测方法。因此，进一步加强免疫学的研究，建立新的、更可靠的免疫学检测方法，成为当前对该病研究的重要任务。

发明内容

本申请的目的是提供新的CyHV-2的单克隆抗体，分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞，以及该单克隆抗体的应用。

为了实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：

本申请一方面公开了一种CyHV-2单克隆抗体，该单克隆抗体由保藏号CCTCC No.C2013114的杂交瘤细胞GFHNV-6G7或保藏号CCTCC No.C2013115的杂交瘤细胞GFHNV-3B5分泌产生。其中杂交瘤细胞GFHNV-6G7于2013年9月13号保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC No.C2013114；杂交瘤细胞GFHNV-3B5于2013年9月13号保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC No.C2013115。

需要说明的是，本申请在对CyHV-2进行研究时，获得了两个杂交瘤细胞，都能够分泌产生高效价的CyHV-2单克隆抗体，因此，分别对其进行了保藏；可以理解，保藏号CCTCC No.C2013114的杂交瘤细胞GFHNV-6G7或保藏号CCTCC No.C2013115的杂交瘤细胞GFHNV-3B5分泌产生的CyHV-2单克隆抗体都可以用于本申请。

本申请率先研制出了CyHV-2的单克隆抗体，为CyHV-2的免疫学检测以及后续研究奠定了基础；可以理解，本申请的CyHV-2单克隆抗体具备良好的特异性和效价，因此可以用于CyHV-2检测。

本申请的另一面公开了，本申请的单克隆抗体在制备CyHV-2检测试剂或设备中的应用。

需要说明的是，本申请中检测试剂或用于相关检测的设备，包括现有的以免疫学为基础的各种检测试剂或设备，如与胶体金免疫层析相结合的快速检测试纸条或试纸卡等，在此不做具体限定；可以理解，本申请的CyHV-2单克隆抗体具备良好的特异性和效价，只要将现有试纸中的抗体替换成本申请的CyHV-2单克隆抗体，即可得到CyHV-2快速检测试纸，不仅可以提高CyHV-2的检测速度和检测效率，而且无需特殊设备，可以很方便进行现场诊断检测。

本申请的另一面公开了一种CyHV-2酶联免疫检测试剂盒，该试剂盒中含有本申请的单克隆抗体。可以理解，本申请的试剂盒以是简单的以试剂形式存在的CyHV-2单克隆抗体，以供实验室进行CyHV-2的免疫学研究；也可以是含有的CyHV-2单克隆抗体的快速检测试纸，以方便检验检疫实践使用；在此不做具体限定。

本申请的再一面公开了分泌CyHV-2单克隆抗体的杂交瘤细胞，其保藏号为CCTCC No.C2013114或CCTCC No.C2013115。