[发明专利]一种简易、高通量微流控化学发光纸芯片的制备及应用

权利要求书

1.一种简易、高通量微流控化学发光纸芯片的制备方法，其特征是包括以下步骤：

1.1.在计算机上设计化学发光微流控纸芯片的中空通道疏水蜡批量打印图案；

1.2.在计算机上设计与中空通道疏水蜡批量打印图案匹配的化学发光试剂批量打印图案；

1.3.在计算机上设计与中空通道疏水蜡批量打印图案匹配的三十二个氧化酶批量打印图案；

1.4.在计算机上设计与中空通道疏水蜡批量打印图案镜像匹配的流速调节疏水蜡批量打印图案；

1.5.将滤纸剪裁成B5尺寸；

1.6.将步骤1.5中裁好的滤纸放置到喷蜡打印机中，将步骤1.1中的中空通道疏水蜡批量打印图案打印到步骤1.5中的B5滤纸上；

1.7.将步骤1.6中带有蜡图案的B5滤纸放置到平板加热器或者烘箱中，在60-150摄氏度下加热0.5-2分钟；

1.8.将步骤1.7中制备的B5滤纸放入喷墨打印机中，按照步骤1.2中的化学发光试剂批量打印图案，将化学发光试剂墨打印到化学发光检测区中，然后按照步骤1.3中的氧化酶批量打印图案，将氧化酶墨打印到酶识别催化微通道中；一种氧化酶批量打印图案用来打印一种氧化酶墨，打印不同氧化酶墨时，只需更换喷墨打印机中的墨盒；

1.9.将步骤1.8中制备的滤纸放入激光切割机中，先沿蜡图案外边缘进行激光切割，再激光切割掉螺旋形区域，即蜡图案上的网格区域，形成中空通道，从而得到微流控化学发光纸芯片A；

1.10.将步骤1.6中带有蜡图案的B5滤纸放入喷墨打印机中；按照步骤1.4中的与中空通道疏水蜡批量打印图案镜像匹配的流速调节疏水蜡批量打印图案，将流速调节疏水蜡打印到步骤1.6中的滤纸反面；

1.11.将步骤1.10中带有蜡图案的滤纸放置到平板加热器或者烘箱中，在60-150摄氏度下加热0.5-2分钟；

1.12.将步骤1.11中制备的滤纸放入激光切割机中，沿蜡图案外边缘进行激光切割，得到微流控化学发光纸芯片B；

1.13.将塑封膜放入激光切割机中，切割一圆形进样口，得到微流控化学发光纸芯片正面塑封膜；

1.14.将步骤1.9中得到的微流控化学发光纸芯片A和步骤1.12中得到的微流控化学发光纸芯片B堆叠在一起夹在两片塑封膜中间，然后使用步骤1.13中得到的微流控化学发光纸芯片正面塑封膜和一片崭新的塑封膜进行塑封封装，制备得到封装的微流控化学发光纸芯片。

2.本发明所述微流控化学发光纸芯片的现场即时检测包括以下步骤：

2.1.将微流控化学发光纸芯片放入掌上发光检测仪的暗盒中；

2.2.将样品溶液滴加到微流控化学发光纸芯片的进样区内；然后盖上暗盒盖，开始检测；通过依次出现的32个化学发光峰值的大小来依次判断葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、乳酸、单酚、多酚、黄嘌呤、胆固醇、血红素、抗坏血酸、细胞色素、D-氨基酸、L-氨基酸、单胺、二胺、NADH、NADPH、赖氨酰、丙酮酸、乙醇、乙醛、胆碱、谷胱甘肽、肌酐、3-α-类固醇、胆红素、白蛋白、球蛋白、丙胺酸、脂肪酸和尿酸是否存在及含量。

3.根据权利要求1所述的中空通道疏水蜡打印图案，其特征是：所设计的微流控化学发光纸芯片的疏水图案构成的亲水区域包括一个螺旋形进样区，三十二个呈环绕分布的直径2.0~8.0 mm化学发光检测区和三十二个宽度均为1.0~4.0 mm，长度为4.0~15.0 mm的酶识别催化微通道；微流控化学发光纸芯片总尺寸为25.0~100.0 mm ×25.0~100.0 mm，形状为正方形；可根据不同的微流控化学发光纸芯片尺寸，调整一张B5纸上打印的微流控化学发光纸芯片个数，可为1-6个。

4.根据权利要求1所述的化学发光试剂打印图案，其特征是：每个化学发光检测区中的化学发光图案的直径为2.0~8.0 mm。

5.根据权利要求1所述的氧化酶打印图案，其特征是：每个酶识别催化微通道中的氧化酶图案的尺寸为1.0~4.0 mm ×1.0~4.0 mm的正方形。

6.根据权利要求1所述的流速调节疏水蜡打印图案，其特征是：流速调节疏水蜡打印图案与中空通道疏水蜡打印图案呈镜像匹配。