[发明专利]一种细菌DNA提取液、提取方法及其应用在审
| 申请号： | 201510035001.4 | 申请日： | 2015-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN104911176A | 公开（公告）日： | 2015-09-16 |
| 发明（设计）人： | 谈小龙;龚剑;李娟;唐乃平 | 申请（专利权）人： | 江苏发士达生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04;C12R1/445;C12R1/46;C12R1/42;C12R1/01 |
| 代理公司： | 淮安市科文知识产权事务所 32223 | 代理人： | 谢观素 |
| 地址： | 223600 江苏省宿*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细菌 dna 提取 方法 及其 应用 | ||
1.一种细菌DNA提取液，其特征在于：由3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸、NP-40、氢氧化钠和水组成，所述3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸在提取液中浓度为0.00001-0.0002mg/mL，所述NP-40在提取液中体积百分含量为0.01-0.02%，所述氢氧化钠在提取液中的浓度为0.01 -0.05mg/mL，提取液pH值为8.0-8.8。
2.如权利要求1所述的细菌DNA提取液，其特征在于：所述3-[(3-胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸在提取液中的浓度为0.0001mg/mL，所述NP-40在提取液中体积百分含量为0.01%，所述氢氧化钠在提取液中的浓度为0.03mg/mL，提取液 pH值为8.3。
3.用权利要求1-2任一项所述的细菌DNA提取液提取细菌核酸的方法，其特征在于包括如下步骤：将1000-3000μl细菌混合液置于离心管中，在15-37℃条件下，10000-15000rpm离心5-10min，弃上清，在沉淀物中加入细菌DNA提取液10-100μl，反应1-10min后，剧烈振荡2min，然后瞬时离心，去除管壁液体，得到细菌混合物的核酸。
4.如权利要求3所述的细菌DNA提取液提取细菌核酸的方法，其特征在于包括如下步骤：将3000μl细菌液置于离心管中，在25℃条件下，12000rpm离心10min，弃上清，在沉淀物质中加入细菌DNA提取液50μl，反应3min后，剧烈振荡2min，然后瞬时离心，去除管壁液体，得到细菌混合物的核酸。
5.如权利要求3或4所述的细菌DNA提取液提取细菌核酸的方法，其特征在于：所述细菌为革兰氏阳性菌和/或革兰氏阴性菌。
6.如权利要求5所述的细菌DNA提取液提取细菌核酸的方法，其特征在于：所述细菌为沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌和/或溶血性链球菌。
7.权利要求3-4任一项所述的细菌DNA提取液提取细菌核酸的方法应用于PCR检测。
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