[发明专利]一株裂殖壶菌及粗甘油培养裂殖壶菌产油脂的方法有效
申请号: | 201510036253.9 | 申请日: | 2015-01-24 |
公开(公告)号: | CN104593270B | 公开(公告)日: | 2019-06-21 |
发明(设计)人: | 姚瑶;周茂洪;万晓云;吴论文;杨美慧 | 申请(专利权)人: | 温州大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P7/64;C12R1/645 |
代理公司: | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人: | 杨采良 |
地址: | 325036 浙江省温州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一株裂殖壶菌 甘油 培养 裂殖壶菌产 油脂 方法 | ||
1.一株裂殖壶菌,其特征在于:该菌株为裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)6961Y01,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏中心登记入册编号为CGMCCNO.9043,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏起始日期为2014年04月14日。
2.一种粗甘油培养裂殖壶菌产油脂的方法,其特征在于:包括如下步骤:
1)将权利要求1中的所述保藏菌株6961Y01接种于种子培养基中活化获得活化菌,然后活化菌转接于种子培养基培养得到种子;
2)将步骤1)所得种子转接于发酵培养基中进行发酵培养,离心得富含油脂的裂殖壶菌菌体。
3.根据权利要求2所述的粗甘油培养裂殖壶菌产油脂的方法,其特征在于:步骤1)所述的种子培养基的组成为:粗甘油,玉米浆,矿物质;
步骤2)所述的发酵培养基的组成为:粗甘油,玉米浆,矿物质,复合维生素;
所述的粗甘油30g·L-1,玉米浆10g·L-1;
所述的矿物质的构成为:NaCl 15g·L-1、KCl 0.5g·L-1、MgSO4·7H2O 2.0g·L-1、K2SO40.65g·L-1、KH2PO41.0g·L-1、(NH4)2SO41.0g·L-1、CaCl2·2H2O 0.17g·L-1、MnCl2·4H2O 3mg·L-1、ZnSO4·7H2O 3mg·L-1、CoCl2·6H2O 0.04mg·L-1、Na2MoO4·2H2O 0.04mg·L-1、CuSO4·5H2O 2mg·L-1、NiSO4·6H2O 2mg·L-1、FeSO4·7H2O 10mg·L-1;
所述的复合维生素的构成为:硫胺素10mg·L-1、核黄素20mg·L-1、维生素B660mg·L-1、钴胺素14mg·L-1、硫辛酸30mg·L-1、维生素K 20mg·L-1、烟酸10mg·L-1、叶酸30mg·L-1。
4.根据权利要求3所述的粗甘油培养裂殖壶菌产油脂的方法,其特征在于:所述种子培养基和发酵培养基的pH为6.0~7.0。
5.根据权利要求3所述的粗甘油培养裂殖壶菌产油脂的方法,其特征在于:所述的粗甘油为将生物柴油副产品粗甘油与水按体积比1:4混合后,调pH至6.0~7.0,经离心去除脂肪酸盐而得。
6.根据权利要求3所述的粗甘油培养裂殖壶菌产油脂的方法,其特征在于:步骤1)所述的活化的步骤为:将保藏菌株6961Y01接种于种子培养基中,于20~30℃,150~160rpm的条件下活化65~75h,获得活化菌;
步骤1)中所述的活化菌转接的步骤为:所得活化菌按4~6%体积百分比接种于种子培养基中,于20~30℃、150~160rpm的条件下培养45~50h;然后再按8~12%体积百分比转接于种子培养基,于20~30℃、60~100%氧饱和度下培养45~50h得种子。
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