[发明专利]一种能靶向抑制ERK信号通路的抗肿瘤多肽及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学及生物医药技术领域，具体地说，涉及一种能靶向抑制ERK信号通路的抗肿瘤多肽及其应用。

背景技术

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)是目前发现的最为重要的促进细胞生长以及肿瘤发生、发展的信号通路之一，因此，很多临床前或临床中正在使用的药物，包括化疗药、靶向治疗药物等都被设计或者被证明通过抑制AKT信号途径从而达到抗肿瘤的效果。

但人们发现，这类药物在经过初期较好的抗肿瘤效应后，往往会产生药物耐受而失效。我们的研究发现，使用PI3K/AKT的抑制剂，如MK2206、NVP-BEZ235处理前列腺癌细胞后，虽然能显著抑制AKT的激活，但却会导致细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases，ERK)信号通路的激活，两者之间存在负反馈调节平衡，见图1。除此之外，该种负反馈调节平衡还存在于乳腺癌、结肠癌、直肠癌等其他类型肿瘤中。

ERK是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)的最重要的亚家族成员，而MAPK也是目前已知的重要的促细胞生长、促肿瘤信号通路。这提示我们，ERK被负反馈激活是PI3K/AKT抑制剂出现耐药的重要分子生物学机制。

然而，目前AKT与ERK信号途径之间的负反馈调节机制仍不清楚，也未见使用PI3K/AKT抑制剂抗肿瘤治疗的同时通过抑制ERK信号通路来提高药物治疗效果的相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种能靶向抑制ERK信号通路的抗肿瘤多肽。

本发明提供了一种多肽，所述的多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明提供了一种分离的核酸分子，它编码序列如SEQ ID NO.2所示的多肽。

作为本发明的一个优选例，所述的核酸分子的序列如SEQ ID NO.3所示。

本发明提供了一种表达载体，所述的表达载体包含有如上所述的核酸分子。

本发明提供了一种药物组合物，它含有序列如SEQ ID NO.2所示的多肽，和药学上可接受的载体。

作为本发明的一个优选例，所述的药物组合物还包含PI3K/AKT抑制剂或紫杉醇类药物。

本发明提供了所述的多肽、所述的核酸分子、所述的表达载体或所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

作为本发明的一个优选例，所述的肿瘤中AKT与ERK信号途径之间存在负反馈调节。

更优选地，所述的肿瘤为前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌、食管癌、鼻咽癌、肺癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌或胰腺癌。

本发明还提供了所述的多肽、所述的核酸分子、所述的表达载体或所述的药物组合物在制备药物中的应用，所述的药物用于克服PI3K/AKT抑制剂或紫杉醇类药物在抗肿瘤治疗过程中出现的耐药。

本发明优点在于：本发明构建了一个靶向抑制ERK信号通路的小分子多肽P2SE，通过一系列生物学实验证明P2SE在多种肿瘤(前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、直肠癌)中均能有效克服PI3K/AKT抑制剂或紫杉醇类药物在抗肿瘤治疗过程中出现的耐药，有显著的协同抗肿瘤作用。由于ERK信号通路存在于多种肿瘤中，是促进细胞生长以及肿瘤发生、发展的重要信号通路之一，因此小分子多肽P2SE可用于此类肿瘤的治疗，优选与PI3K/AKT抑制剂或紫杉醇类药物联合使用。

附图说明

图1.LNCaP、C4-2、C4-2B为三种前列腺癌细胞。MK2206：0.5μM，NVP-BEZ23550nM，处理24小时后收集细胞提取蛋白，western blot检测。显示MK2206、NVP-BEZ235处理前列腺癌细胞后，虽然能显著抑制AKT的激活，但却会导致ERK信号通路的激活。

图2.能与支架蛋白IQGAP1的CC结构域结合的FOXO1片段的氨基酸序列的鉴定。

图3.pCMV-HA载体图谱。

图4.CHX 10μg/ml，预处理30min，MK22060.5μM，处理6小时后收集细胞提取蛋白，western blot检测。

图5.MK22060.5μM，持续处理48小时，MTS检测吸光度。

图6.MK22060.5μM，处理6小时后收集细胞提取蛋白，western blot检测。