[发明专利]一种具有雌激素活性的蓬子菜提取物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种中草药有效成分提取物，尤其涉及一种具有雌激素活性的蓬子菜提取物及其制备方法，本发明还涉及该蓬子菜提取物在制备提高雌激素水平和刺激子宫发育的药物中的应用，属于中草药提取技术领域。

背景技术

许多疾病的发生与体内雌激素水平密切相关，如骨质疏松、心血管疾病等，随着妇女进入绝经期，这些疾病的发病风险也明显增加。补充外源性激素的替代疗法虽可减轻围绝经期的临床症状，降低骨质疏松、心血管疾病的发病风险，但长期应用外源性雌激素亦增加乳腺癌、子宫内膜癌的发生率，使激素替代疗法的广泛应用受到了限制。植物雌激素是从天然植物中提取的结构与内源性雌激素相似的一系列化合物，现代药理研究及流行病学资料表明，植物雌激素对体内的雌激素水平具有双向调节作用，可参与多种疾病的预防和治疗，尤其是与雌激素水平相关的乳腺癌、前列腺癌、更年期综合征及心血管疾病等，且副作用小，日益受到研究者们的关注。随着研究的不断深入，寻找具有雌激素样药理作用的新的药用植物及其有效部位成为解决骨质疏松、心血管疾病等雌激素相关性疾病的有效途径。

蓬子菜(Galium verum L.)为茜草科(Rubiaceae)拉拉藤(Galium)属植物蓬子菜的干燥全草。始载于《救荒本草》，其性温，味苦、甘，具有清热解毒、利胆、利湿止痒、行血的功效，既可内服也可外用，民间用其治疗肝炎、跌打损伤、妇女血气痛、荨麻疹、稻田皮炎等。蓬子菜不同溶媒提取物分离得到的化学成分主要包括黄酮、蒽醌、环烯醚萜、苯丙素、有机酸、三萜及挥发油类，其中以黄酮、蒽醌和环烯醚萜类化合物较多。目前对蓬子菜的现代药理研究主要集中在抗肿瘤和抗氧化损伤的研究上，研究表明蓬子菜具有显著抑制人肝癌细胞HepG2增殖、诱导其凋亡的作用；对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的亦具有良好保护作用，未见有关雌激素药理作用的研究和相关提取物制备方法的介绍。目前有关蓬子菜总黄酮的提取，有报道采用水提后醇提，碱溶酸沉，并采用有机溶剂萃取后再上树脂柱的方法，虽然得到总黄酮含量较高，但黄酮苷类成分在碱溶酸沉过程中容易发生水解而被破坏，同时大量有机溶剂的引入也是不利因素之一。本发明制备方法的效果是：常规提取后，采用体积百分比为8～12％乙醇溶解浸膏上样，体积百分比为15～25％乙醇洗脱除杂，改善水洗脱除杂效果差的缺点，可充分去除杂质，且保证有效部位的收率及含量，该提取精制方法工艺简单，制备时间短，树脂柱重复利用率高。制得的蓬子菜雌激素样药理作用提取物中主要为黄酮类化合物，且有效部位中总黄酮类化合物含量达57％以上，总黄酮类化合物中主要为木犀草苷。蓬子菜雌激素样药理作用提取物可刺激小鼠子宫发育，促进其体重增加，提高雌激素水平。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺简单、提取率高和安全性高的具有雌激素活性的蓬子菜提取物的制备方法。

为了实现本发明的目的，本发明提供了如下技术方案：

一种具有雌激素活性的蓬子菜提取物的制备方法，包括以下步骤：

(1)取蓬子菜全草粗粉，用体积百分比为60～80％的乙醇进行超声提取和回流提取，将得到的提取液过滤，滤液经减压回收乙醇后，得浸膏；

(2)将浸膏用体积百分比为8～12％的乙醇溶解后，上样到大孔吸附树脂柱进行静置，先用体积百分比为15～25％的乙醇洗去杂质，再用体积百分比为50～70％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，低温干燥，即得一种具有雌激素活性的蓬子菜提取物。

在本发明中，优选的，步骤(1)中所述超声提取的时间为20～40min，使细胞充分破碎；所述回流提取为用体积百分比为60～80％的乙醇溶液提取两次，每次提取时间为1～2h；所述减压回收乙醇为50℃下减压回收乙醇。

在本发明中，优选的，所述回流提取的第一次提取中乙醇用量为10倍重量的蓬子菜全草粗粉，第二次提取中乙醇用量为8倍重量的蓬子菜全草粗粉。

在本发明中，优选的，步骤(2)中所述静置的时间为2～4h；所述洗去杂质和洗脱的流速均为每小时1.0～1.5倍柱体积；所述洗去杂质和洗脱的时间均为1～2h；所述减压回收乙醇为50℃下减压回收乙醇。

在本发明中，优选的，步骤(2)中所述大孔吸附树脂为AB-8大孔吸附树脂。

在本发明中，优选的，步骤(2)中所述大孔吸附树脂在上样前，树脂常规处理后，预先用体积百分比为8～12％的乙醇洗脱2倍柱体积。

在本发明中，优选的，蓬子菜全草粗粉与树脂的质量比为1:2～1:4。