[发明专利]一种针对脑肿瘤的DNA靶向纳米载药分子的制备方法有效
| 申请号： | 201510039583.3 | 申请日： | 2015-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN104645338B | 公开（公告）日： | 2018-05-04 |
| 发明（设计）人： | 何丹农;夏智伟;王萍;严一楠;刘婷;金彩虹 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学;上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 |
| 主分类号： | A61K47/64 | 分类号： | A61K47/64;A61K31/704;A61P35/00 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司31236 | 代理人： | 徐红银,郭国中 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 针对 肿瘤 dna 靶向 纳米 分子 制备 方法 | ||
1.一种针对脑肿瘤的DNA靶向纳米载药分子的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下：
步骤一、将DNA单链加入Tris-MgCl溶液中混合、反应，得DNA四面体溶液；
步骤二、将所述DNA四面体溶液和靶肽溶液加入到PBS溶液、CuSO4溶液、三(2-羧乙基)膦溶液、叔丁基三氯乙酰亚胺酯溶液的混合溶液中，恒温发生点击反应，即得靶向DNA四面体溶液；
步骤三、向所述靶向DNA四面体溶液中加入肿瘤药物，恒温震荡，离心，去上清，所得沉淀即为DNA靶向纳米载药分子；
所述肿瘤药物与靶向DNA四面体的摩尔比大于40:1；
步骤一中，所述反应具体为：在PCR仪中，反应温度为95℃，10分钟后快速冷却至4℃，继续反应30分钟；
步骤三中，所述肿瘤药物为阿霉素；
所述制备方法还包括将步骤三所述的DNA靶向纳米载药分子重悬在100μL PBS溶液中；所述PBS溶液的pH为7.4。
2.根据权利要求1所述的针对脑肿瘤的DNA靶向纳米载药分子的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述DNA单链为可通过碱基互补配对自组装成DNA四面体三维构型的DNA单链。
3.根据权利要求2所述的针对脑肿瘤的DNA靶向纳米载药分子的制备方法，其特征在于，所述DNA单链的序列如TSP-1、TSP-2、TSP-3、TSP-4所示；
所述TSP-1的序列如SEQ ID No.1所示，所述TSP-2的序列如SEQ ID No.2所示，所述TSP-3的序列如SEQ ID No.3所示，所述TSP-4的序列如SEQ ID No.4所示。
4.根据权利要求1所述的针对脑肿瘤的DNA靶向纳米载药分子的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述靶肽溶液中靶肽的序列包括RGERPPR或GNKRTRG。
5.根据权利要求1所述的针对脑肿瘤的DNA靶向纳米载药分子的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述点击反应的条件具体为：37℃、175rpm震荡5小时。
6.根据权利要求1所述的针对脑肿瘤的DNA靶向纳米载药分子的制备方法，其特征在于，步骤三中，所述恒温震荡的条件具体为：37℃、175rpm震荡3小时。
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