[发明专利]一种培养猪肺炎支原体培养基及其制备方法在审
申请号: | 201510042434.2 | 申请日: | 2015-01-27 |
公开(公告)号: | CN104560835A | 公开(公告)日: | 2015-04-29 |
发明(设计)人: | 候凤;王钢;李新苹;贺笋;李延涛 | 申请(专利权)人: | 新疆天康畜牧生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/35 |
代理公司: | 乌鲁木齐中科新兴专利事务所 65106 | 代理人: | 李静 |
地址: | 830013 新疆维吾尔*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 培养 肺炎 支原体 培养基 及其 制备 方法 | ||
1.一种培养猪肺炎支原体的培养基,其特征在于该培养基是由基础培养基为PPLO肉汤粉3.0-5.0g、脑心浸液粉2.0-4.0g、去离子水660-740.0ml和琼脂粉0-15.0g,辅助培养基为10×汉克氏平衡盐溶液20-40.0ml、酵母浸出液20-40.0ml、青霉素100-300U/ml、杆菌肽粉5-20U/ml、0.25%酚红5-10.0ml和灭活的猪血清100-250.0ml制成。
2.根据权利要求1所述的培养猪肺炎支原体培养基的制备方法,其特征在于按下列步骤进行:
a、制备基础培养基:
将基础培养基为PPLO肉汤粉3.0-5.0g、脑心浸液粉2.0-4.0g、去离子水660-740.0ml和琼脂粉0-15.0g混合搅拌均匀,使之完全溶解,在温度100℃加热10分钟,冷却后备用;
b、制备辅助培养基:
将辅助培养基为10×汉克氏平衡盐溶液20-40.0ml、酵母浸出液20-40.0ml、青霉素100-300U/ml、杆菌肽粉5-20U/ml、0.25%酚红5-10.0ml和灭活的猪血清100-250.0ml混合搅拌均匀,使之完全溶解,在温度4℃保存备用;
c、将步骤a基础培养基和步骤b辅助培养基混合,用1mol/L氢氧化钠溶液调整pH值至7.6,用0.22μm滤膜过滤除菌,即得猪肺炎支原体的液体或固体培养基。
3.根据权利要求2所述的培养猪肺炎支原体培养基的制备方法,其特征在于步骤b辅助培养基中的酵母浸出液为取干酵母粉100g,加去离子水1000ml,充分混匀后,在温度37℃下发酵60分钟,煮沸10分钟,冷却,再以10000r/min离心20分钟,收取上清液,将上清液过滤除菌,定量分装,置于温度2-8℃保存备用。
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