[发明专利]用栀子植物的叶子制备栀子环烯醚萜苷类化合物的工艺方法

说明书

技术领域

本发明属于生物制品的提取制备技术领域，涉及栀子环烯醚萜苷类有效成分制备工艺方法。

背景技术

栀子环烯醚萜苷类化合物是国际公认的中药栀子的主要有效成分。该类成分一直以来都是从茜草科植物栀子的干燥成熟的果实中提取得到。栀子果是中国传统中药，也是中国近年来大力发展，拟打入国际市场的中国特色产品。栀子果中除含有栀子苷或京尼平苷等环烯醚萜苷类成分外还含有大量栀子色素。其中栀子环烯醚萜苷类化合物具有多种用途：可以制成天然食用色素栀子蓝，也是用于治疗心脑血管、肝胆等疾病及糖尿病的原料药物。具体药用活性包括：（1）利胆作用；（2）镇静、降压作用；（3）抗微生物作用，能对许兰氏黄癣菌、腹股沟表皮癣菌、红色表皮癣菌等多种真菌及血吸虫有抑制作用；（4）解热作用；（5）抗炎作用；（6）降低血压；（7）促进胰腺分泌，并能保持胰细胞膜的结构和功能；此外还有抑制人口肌收缩、止血、保肝、止泻、镇痛和防治动脉粥样硬化等作用。

栀子环烯醚萜苷类化合物成分具有广阔的应用领域，但传统的制备方法都是从栀子果中提取，而栀子果含有大量的干扰物质，导致提取工艺复杂，物耗过大、收得率低，同时原料成本也很高，产品极其昂贵，从而限制了该类成分的大量应用和我国近年相关产业的发展。

发明内容

为了降低栀子环烯醚萜苷类化合物生产成本及加工难度，本发明提供一种用栀子植物的叶子作为加工原料制备栀子环烯醚萜苷类化合物的工艺方法。

从栀子叶中制备栀子环烯醚萜苷类化合物的工艺步骤如下：

（1）在新鲜的栀子的叶子中或干燥粉碎的栀子的叶子粉中加入加打浆剂，打浆，制成栀子叶浆；

（2）将栀子叶浆过滤或离心，加洗涤剂搅拌洗涤1次以上，再过滤或离心，合并保留的上清液或滤液即为栀子环烯醚萜苷类化合物的提取液；

（3）将栀子环烯醚萜苷类化合物的提取液浓缩，上色谱柱洗脱，即得到栀子环烯醚萜苷类化合物，为类白色或白色粉末；其中栀子苷的含量为20～99.9%。

从栀子叶中制备栀子环烯醚萜苷类化合物的具体工艺操作步骤如下：

（1）栀子叶浆的制备

将新鲜的栀子叶和打浆剂按料液体积比1:0.2～3（w/w）混合打浆，在10～98℃，提取1～200分钟，得到栀子叶浆；或将干燥的栀子叶粉碎后与提取剂，按料液比1:1~8（w/w）混合搅拌，在10～98℃，提取10～600分钟，得到栀子叶浆；

（2）栀子环烯醚萜苷类化合物的提取液制备

将栀子叶浆离心或过滤，在离心沉淀或过滤残渣中按料液体积比1:0.2～2（w/w）加洗涤剂搅拌洗涤1～2次，并再次分别离心或过滤，合并离心上清液或滤液即为栀子环烯醚萜苷类化合物的提取液；

（3）制得环烯醚萜苷类化合物

将栀子环烯醚萜苷类化合物的提取液减压浓缩到原体积的10～100%，过滤，然后进行色谱法纯化，色谱填料为树脂或反相C18，浓缩的提取液样品上到色谱柱中，先用1～10倍柱体积的水洗涤，然后，用5～90%的甲醇或乙醇溶液等度洗脱或梯度洗脱，收集目标成分，脱去溶剂得到干燥的白色或类白色粉末，即为栀子环烯醚萜苷类化合物，栀子环烯醚萜苷类化合物中栀子苷（gardenoside）的含量为20～99.9%。

所述打浆剂为水或浓度为5～95%的甲醇或乙醇。

所述洗涤剂为水或浓度为5～95%的甲醇或乙醇。

所述栀子为栀子属（Gardenia Ellis）植物山栀子或水栀子或小叶栀子。

所述步骤（2）中的离心转速为3000～10000转/分钟，离心时间为5～30分钟。

所述步骤（2）中的过滤为过20～80目筛的压滤或抽滤。

所述步骤（3）中的洗脱为等度洗脱或梯度洗脱。

所述等度洗脱是：浓度为5～90%甲醇或浓度为5～90%乙醇溶液的洗脱，洗脱时间为10～600分钟。

梯度洗脱条件为：起始以浓度为1～5%甲醇或乙醇洗脱，甲醇或乙醇的浓度随洗脱时间均匀逐渐升高，最后醇的浓度达到50～100%，洗脱时间为10～600分钟。

本发明的有益技术效果体现在下述几个方面：