[发明专利]一种荧光淬灭分离鉴定化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种分离化合物的方法，具体涉及一种荧光淬灭分离鉴定化合物的方法。

背景技术

薄层色谱，英文为thin layer chromatography，色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术，属固—液吸附色谱，兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品(几到几微克，甚至0.01微克)的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，因此，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。是将吸附剂、载体或其他活性物质均匀涂铺在平面板(如玻璃板、塑料片、金属片等)上，形成薄层(常用厚度为0.25毫米左右)后，在此薄层上进行层析分离的分析方法。

定量分析可分为洗脱测定法,薄层层析法和原位扫描法：

洗脱测定法

①洗脱测定法，将展开后的组分斑点处的吸附剂刮下，用适宜溶剂将组分洗脱溶出，然后用适当方法进行定量测定。常用方法为比色法、紫外－可见分光光度法，也可用电化学分析法等。

原位扫描法

②原位扫描法，将展开后的薄层板放在光密度计内，以一定波长的光照射，同时使斑点移过光路，由于斑点对光的吸收，可绘出峰形曲线，由峰面积与标准样品的吸收相比较而求出含量。

薄层层析法

薄层层析法以吸附层析使用最为普遍。常用的吸附剂为硅胶、氧化铝等。薄层层析和其他层析法一样，除吸附法外，也可进行分配、离子交换、分子排阻等机理的层析，即将铺制薄层的材料相应换为涂以固定相的载体、离子交换剂、凝胶等，其操作与吸附法基本相同。

一些化合物无颜色，也无荧光，也没有合适的显色剂可与之显色，又无可生成荧光生物的条件，比较难以测定。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种荧光淬灭分离鉴定化合物的方法，以克服现有技术所存在的上述缺点和不足。

一些化合物无颜色，也无荧光，也没有合适的显色剂可与之显色，又无可生成荧光生物的条件，此时长将这类化合物点在含有无机荧光物质，如锰激活的硅酸锌或银激活的硫化锌、硫化镉(ZnS、CdS、Ag)的薄层板即荧光板上进行分离，分离后置薄层板即荧光板上进行分离，分离后薄层于紫光灯下观察，此时薄层背景呈荧光，对紫外光有吸收的化合物斑点处，由于一部分光被化合物吸收，照射到薄层上的紫外光强度有所减弱，故产生的荧光减弱，化合物呈暗色斑点，用这种方法可以鉴定化合物的Rf值，也可在定量时测定斑点荧光减弱程度测定化合物的含量，但在定量时更多的是荧光淬灭的方法来定被测物的位置，然后用紫外区的波长来测定其含量，用荧光薄层分离后定位。

本发明所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现：

一种荧光淬灭分离鉴定化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：取对照品，加60-90℃石油醚制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：取样品适量，混匀，取0.2g，精密称定，置25ml量瓶中，加60-90℃石油醚10ml，在50℃水浴上加热数分钟融化，放冷，加60-90℃石油醚稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液，即得；

(3)展开剂的制备：60-90℃石油醚-乙酸乙酯；

(4)薄层条件：GF254薄层板，点样，展开；

(5)检视；取出，晾干后，于254nm紫外灯光下检视。

步骤(4)，点样时，吸取上述对照品溶液与供试品溶液各5μl。

步骤(3)，展开剂为60-90℃石油醚-乙酸乙酯，其体积比为17：3。

所述样品为桂皮醛。

本发明的有益效果：

本发明采用荧光淬灭的方法来定被测物的位置，然后用紫外区的波长来测定其含量，用荧光薄层分离后定位。

本发明可以连续进行观测，连续进行数据存储。可以对结果进行分析、对比。

附图说明

图1为薄层层析结果。样品：1.供试品130519 2.供试品130524 3.供试品130526 4.桂皮醛对照品5.供试品130519 6.供试品130524 7.供试品130526。

图2为薄层层析结果。样品：1.供试品130519 2.供试品130524 3.供试品130526 4.桂皮醛对照品5.供试品空白。

图3为薄层层析结果。样品：6.供试品130519 7.供试品130524 8.供试品130526 9.桂皮醛对照品10.供试品空白。