[发明专利]石墨烯/类过氧化物酶双信号放大检测白血病的生物传感方法有效
申请号: | 201510053919.1 | 申请日: | 2015-02-02 |
公开(公告)号: | CN104597240A | 公开(公告)日: | 2015-05-06 |
发明(设计)人: | 赵永祥;苏婧;卢小玲;黄勇 | 申请(专利权)人: | 广西医科大学 |
主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574;G01N33/553 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 530021 广*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 石墨 过氧化物 信号 放大 检测 白血病 生物 传感 方法 | ||
1.一种用于白血病细胞检测的试剂盒,含有如下(a)和(b):
(a)磁珠捕获探针;
所述磁珠捕获探针由磁珠和固定于所述磁珠上的捕获探针组成;所述捕获探针为序列表中序列1所示的单链DNA分子;
(b)适配体功能化Hemin-石墨烯复合纳米材料;
所述适配体功能化Hemin-石墨烯复合纳米材料由经氯化高铁血红素修饰的石墨烯和固定于所述经氯化高铁血红素修饰的石墨烯上的适配体探针组成;所述适配体探针为序列表中序列2所示的单链DNA分子。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述适配体功能化Hemin-石墨烯复合纳米材料是按照包括如下步骤的方法制备得到的:按照所述经氯化高铁血红素修饰的石墨烯与所述适配体探针的配比为0.5mg:4-40nmol的比例,将所述经氯化高铁血红素修饰的石墨烯的悬浊液与所述适配体探针的溶液混合,20-25℃避光孵育16-24h,得到所述Hemin-石墨烯复合纳米材料。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:在进行所述20-25℃避光孵育16-24h的期间,还包括向孵育体系中加入NaCl得到含NaCl体系,NaCl在所述含NaCl体系中的浓度为10mM的步骤。
4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂盒,其特征在于:所述经氯化高铁血红素修饰的石墨烯是将氧化石墨烯和氯化高铁血红素按照质量比为1:(1~10)的比例制备得到的。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于:所述经氯化高铁血红素修饰的石墨烯是按照包括如下步骤的方法制备得到的:将氧化石墨烯和氯化高铁血红素按照质量比为1:(1~10)的比例混合后,加入氨水和水合肼,60℃孵育2~6h,得到所述经氯化高铁血红素修饰的石墨烯。
6.根据权利要求1-5中任一所述的试剂盒,其特征在于:所述磁珠捕获探针按照包括如下步骤的方法制备得到:将经生物素标记的所述捕获探针与经链霉亲和素标记的所述磁珠共同孵育,获得所述磁珠捕获探针。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于:进行所述孵育时,经生物素标记的所述捕获探针与经链霉亲和素标记的所述磁珠的配比为100pmol:1mg;或
所述孵育为20-30℃震荡孵育10-30min;或
所述孵育是在结合缓冲液中进行的;所述结合缓冲液的溶剂为水,溶质及浓度如下:Tris 0.605g/L,EDTA 0.185g/L,NaCl 58.45g/L;所述结合缓冲液的pH值为7.5。
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