[发明专利]一株尾孢属内生真菌菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物领域中一株尾孢属内生真菌菌株及其应用，所述次生代谢产物可为多糖、黄酮、三萜和总酚中的四种、三种、两种或一种。

背景技术

植物的代谢产物可分为两类，即初生代谢产物和次生代谢产物。初生代谢产物是指维持植物体正常生命活动所必需的物质和能量代谢，如脂类、氨基酸、核酸以及它们的多聚体等，这些物质的分子量一般很大，又称为大分子化合物。次生代谢产物是由次生代谢产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物(习惯上称为天然产物)，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性，次生代谢产物可分为苯丙素类、醌类、黄酮类、单宁类、类萜、甾体及其甙、生物碱七大类。在植物的某个发育时期或某个器官中，次生代谢产物可能成为代谢库的主要成分，比如橡胶树产生大量橡胶和甜菊叶中甜菊甙的含量可达干重的10％以上。

植物中直接或间接的提取是目前人们获得天然产物的主要手段，但随着人口的增多市场需求量的增加，直接从植物中提取次生代谢产物已经难以满足需求，所以发展新的高效生产这些重要的次生代谢产物方法迫在眉睫。内生真菌是在宿主体内生存并完成生活周期的真菌，长期寄生在某种植物上的内生真菌通常能与该宿主植物协同演化，宿主植物与其内生真菌之间可能存在基因重组的现象，从而使得宿主植物上的内生真菌能产生与宿主植物相同的代谢产物。近年来发现的天然产物中有51％来自植物内生真菌，38％来自土壤微生物，11％来自植物和动物，显然内生真菌己成为天然产物的重要资源。

野生碗豆生存环境原始、复杂，种群多样性高，其内生真菌的丰富度及多样性较其它物种更为优越。通过对野生碗豆内生真菌的分离可得到一些较为原始及次生代谢产物多样的内生真菌。尾孢属(Cercospora)真菌可导致草坪叶斑病，常见的有4种类型：引起翦股颖叶斑病的翦股颖尾孢菌(C.agrostidis)、引起羊茅叶斑病的羊茅尾孢菌(C.festucae)、引起野牛草和狗牙根叶斑病的C.seminalis和引起钝叶草叶斑病的C.fusimaculans.。也有关于尾孢菌作为水葫芦生防菌的应用，但关于尾孢属内生真菌次生代谢产物分析报道甚少。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何利用微生物生产次生代谢产物，所述次生代谢产物为多糖、黄酮、总三萜和总酚中的四种、三种、两种或一种。

为解决上述技术问题，本发明提供了一株可以产生次生代谢产物的内生真菌，所述次生代谢产物为多糖、黄酮、总三萜和总酚中的四种、三种、两种或一种。

本发明提供的内生真菌是尾孢属(Cercospora sp.nov.)WDL2，该菌株已于2014年10月27日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，地址为：中国武汉武汉大学)，保藏编号为CCTCC NO：M 2014518。

本发明的另一个目的是提供一种菌剂，该菌剂的活性成分为所述的尾孢属WDL2(Cercospora sp.nov.WDL2)CCTCC NO：M 2014518。

上述菌剂可为产生次生代谢产物多糖、黄酮、总三萜和总酚中的四种、三种、两种或一种的菌剂。

所述菌剂还可以包括载体。所述载体可为固体载体或液体载体。所述固体载体可为矿物材料、植物材料或高分子化合物；所述矿物材料可为粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一种；所述植物材料可为玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一种；所述高分子化合物可为聚乙烯醇和/或聚二醇。所述液体载体可为有机溶剂、植物油、矿物油或水；所述有机溶剂可为癸烷和/或十二烷。所述菌剂中，所述活性成分可以以被培养的活细胞、活细胞的发酵液、细胞培养物的滤液或细胞与滤液的混合物的形式存在。所述组合物的剂型可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。

根据需要，所述菌剂中还可添加表面活性剂(如吐温20、吐温80等)、粘合剂、稳定剂(如抗氧化剂)、pH调节剂等。

所述尾孢属WDL2(Cercospora sp.nov.WDL2)CCTCC NO：M 2014518在生产次生代谢产物多糖、黄酮、总三萜和总酚中的四种、三种、两种或一种的应用也属于本发明的保护范围。

所述以尾孢属WDL2(Cercospora sp.nov.WDL2)CCTCC NO：M 2014518为活性成分的菌剂在生产次生代谢产物多糖、黄酮、总三萜和总酚中的四种、三种、两种或一种的应用也属于本发明的保护范围。