[发明专利]一种对肝癌细胞具有还原响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医用材料领域，具体涉及一种对肝癌细胞具有还原响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备方法。

背景技术

癌症(恶性肿瘤)已成为当前威胁人类健康的最主要疾病之一，并且其发病率保持逐年上升的趋势。目前，化学疗法仍然是最重要的治疗手段。传统的化疗方法，由于抗癌药物不能特异识别靶细胞，药物进入体内后分布在体内的各个器官中，对病变部位的特异性分布较少。这些药物的细胞毒性较大，能杀伤肿瘤细胞的同时也能破坏正常的组织细胞，具有严重的副作用，给患者带来极大的痛苦。因此，构建新型的智能响应控制释放体系，使其不仅能特异性的识别靶向细胞，还能定时、定量的将药物导入病变部位，提高药物的利用率，减少毒副作用，具有重要的作用。

近年来一系列环境响应性的新型细胞靶向控释体系被构建，他们通过靶向部位的特殊环境刺激，药物系统产生响应性将药物可控释放到靶向部位起到治疗作用。这一新型靶向药物体系在体内循环系统中能够稳定的存在，而在靶向部位由于环境的改变，载药系统随机产生响应性，一般通过载体解离，键断裂，降解等方法使药物释放到靶向部位。

目前，介孔硅以其优异的性能在智能药物控释体系中被广泛应用为药物载体，但介孔硅作为药物载体难以降解，而且介孔硅载体的过度使用可能引起一些副作用，像细胞突变、慢性支气管炎甚至肺癌，因此，构建新型的药物载体仍然是一个大的挑战。

发明内容

本发明是为了解决当前药物载体毒副作用大，难以降解的问题，而提供了一种对肝癌细胞具有还原响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备方法。

本发明的一种对肝癌细胞具有还原响应性和细胞靶向的介孔磷灰石纳米药物载体的制备方法按以下步骤进行：

一、模板剂的准备：将模板剂F127和泛酸钙单水合物溶解在去离子水中，在搅拌速度为250r/min～400r/min下搅拌至得到清晰乳状液，得到F127-泛酸钙混合液，即得到模板剂；

步骤一中所述的模板剂F127与泛酸钙单水合物的质量比为1：(4～8)；步骤一中所述的模板剂F127与去离子水的质量比为1：(30～100)；

二、介孔羟基磷灰石纳米粒子的制备：将K₂HPO₄·3H₂O溶解在去离子水中，得到K₂HPO₄溶液，然后用NH₃·H₂O调解K₂HPO₄溶液的pH值至pH值为10～14，再将pH值为10～14的K₂HPO₄溶液以滴加速度为1.0g/min～3.0g/min滴加到F127-泛酸钙混合液中，搅拌均匀后采用水浴回流的方式进行加热，控制水浴加热温度为80～100℃，回流时间为24h～48h，完成水浴回流反应，将水浴回流反应后的溶液过滤，收集白色沉淀物，将白色沉淀物在温度为80～150℃的真空条件下干燥12h～24h，得到干燥后的白色沉淀物，然后将干燥后的白色沉淀物在温度为200～300℃下预烧2h～6h，再在马弗炉中煅烧，控制煅烧温度为500～600℃，煅烧时间为6h～10h，得到介孔羟基磷灰石纳米粒子；

步骤二中所述的K₂HPO₄·3H₂O与去离子水的质量比为1：(10～13)；步骤二中所述的pH值为10～14的K₂HPO₄溶液中的K₂HPO₄·3H₂O质量与F127-泛酸钙混合液中F127的质量比为(2～5)：1；

三、介孔羟基磷灰石的氨基化：将步骤二得到的介孔羟基磷灰石纳米粒子均匀分散在甲苯溶液中，在搅拌速度为300r/min～600r/min下搅拌10min～30min后，加入3-氨丙基三甲氧基硅烷，然后置于温度为60～80℃的水浴锅中回流24h～48h，离心冷冻干燥后得到氨基化的介孔磷灰石；

步骤三中所述的介孔羟基磷灰石纳米粒子的质量与甲苯溶液的体积的比为1g：(50～100)mL；步骤三中所述的甲苯溶液与3-氨丙基三甲氧基硅烷的体积比为(8～12)：1；