[发明专利]米曲霉发酵液、该发酵液降解稻草粉制备的糖液及制备方法和用途

权利要求书

1.一种米曲霉发酵液的制备方法，其特征在于，所述米曲霉发酵液含有木质素过氧化物酶酶活性100-1000U/L和外切纤维素酶酶活性100-300U/L；所述米曲霉发酵液是以稻草粉为原料，米曲霉为菌株制备而成，所述制备方法包括以下步骤：

a.试管扩大培养：将米曲霉菌种接种于马铃薯葡萄糖培养基中，在温度25-45℃下培养2-8d后，进行1-10℃保藏，制得米曲霉试管斜面孢子；

b.液体摇瓶培养：将一环米曲霉试管斜面孢子接种于于装有20-100ml液体摇瓶培养基的三角瓶中，三角瓶在转速为50-160转/分，温度20-38℃的条件下，摇床培养18-56h，制成液体摇瓶菌种；

c.一级种子罐种子培养：按接种量为1%-20%将液体摇瓶菌种接种于种子罐培养基中，在温度为20-38℃，搅拌转速为50-160转/分，通气量为0.2-1.8:1的条件下，培养18-50h，制成一级种子罐菌种；

所述接种量为液体摇瓶菌种与种子罐培养基的体积比；所述通气量为每分钟通入气体的体积与种子罐培养基体积比；

d.液体发酵培养：按接种量为1-20%将一级种子罐菌种接种到发酵培养基中，在温度20-38℃，搅拌转速50-200转/分，通气量为0.2-1.8：1的条件下，培养2-7d，得到米曲霉发酵液；

所述接种量为一级种子罐菌种与发酵培养基的体积比；所述通气量为每分钟通入气体的体积与发酵培养基的体积比；

其中，所述液体摇瓶培养基和种子罐培养基通过将培养基原料进行灭菌制得，每100ml培养基中含有的原料各成分的重量为：

米糠0.2-2g 葡萄糖0.1-3g 酵母粉0.1-1g

氯化亚铁0.001-0.02g 硫酸镁0.001-0.2g

磷酸氢二钾0.01-0.2g；

所述发酵培养基通过将培养基原料进行灭菌制得，每100ml培养基中含有的原料各成分的重量为：

稻草粉1-8g 葡萄糖0.1-3g 酵母粉0. 3-3g

氯化亚铁0.001-0.02g 硫酸镁0.001-0.2g

磷酸氢二钾0.01-0.2g 米糠0.1-5g。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述米糠的粒度为10-100目。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述一级种子罐菌种经二级种子罐种子培养后，再进行液体发酵培养，所述二级种子罐种子培养工艺为：

按接种量为5-20%将一级种子罐菌种接种于种子罐培养基中，在温度20-30℃，搅拌转速52-100转/分，每分钟通气量为1-1.8：1的条件下，培养20-30h，制得二级种子罐菌种；

所述接种量为一级种子罐菌种与二级种子罐的种子罐培养基的体积比。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述二级种子罐菌种经三级种子罐种子培养后，再进行液体发酵培养，所述三级种子罐种子培养工艺为：

按接种量为10-20%将二级种子罐菌种接种于种子罐培养基中，在温度20-30℃，搅拌转速52-80转/分，每分钟通气量为1-1.8：1的条件下，培养20-30h，制得三级种子罐菌种；

所述接种量为二级种子罐菌种与三级种子罐的种子罐培养基的体积比。

5.一种利用权利要求1所述制备方法获得的米曲霉发酵液水解稻草粉制备糖液的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

a）将热处理的稻草粉、米曲霉发酵液和水混合，预热；

或者将热处理的稻草粉、粗酶粉和水混合，预热；

b）添加H₂O₂溶液，搅拌，降解，获得混合液；

c）将混合液抽滤，收集滤液，获得降解稻草粉糖液。