[发明专利]一种以柠檬提取液为防褐化培养基的蝴蝶兰防褐化组培方法

权利要求书

1.一种以柠檬提取液为防褐化培养基，其特征在于，各阶段培养基由如下组分组成：

(1)初代培养基

每升N6基本培养基中添加6-BA 8.0mg、NAA 0.5mg、柠檬提取液150mg、琼脂8g、蔗糖30g，培养基pH＝5.6；或

(2)增殖分化培养基

每升N6基本培养基中添加+6-BA 8.0mg、NAA 0.5mg、柠檬提取液150mg、椰汁150g、琼脂8g、蔗糖30g，培养基pH＝5.6。

2.一种以柠檬提取液为防褐化培养基的蝴蝶兰防褐化组培方法，包括外植体消毒、初代培养和增殖分化培养，生根培养、炼苗和移栽，其特征在于，

所述初代培养是指：

将消毒处理的外植体接入权利要求1所述的初代培养基上，25±1℃、光照1500-2000Lx；光照时间为10-12小时/天，培养5-6周；

所述增殖分化培养是指：

将初代培养后的没有发生褐化的组织接入权利要求1所述的增殖分化培养基，25±1℃、光照1500-2000Lx；光照时间为10-12小时/天，培养至分化出幼苗。

3.根据权利要求2所述的一种以柠檬提取液为防褐化培养基的蝴蝶兰防褐化组培方法，其特征在于：所述生根培养是指:

将增殖分化培养后的苗高2cm的无根小苗，按每瓶1株，接种于MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+琼脂8g/L+蔗糖30g/L培养基中，培养2周。

4.权利要求2或3所述的一种以柠檬提取液为防褐化培养基的蝴蝶兰防褐化组培方法，其特征在于：所述炼苗是指：

将生根培养后的成苗每隔25-30天重新转入生根培养基，如此反复2-3次；将壮苗后的成苗瓶口打开，在培养室半遮光放置2-3日，期间适时补充水分，使组培苗逐步适应外界环境，达到炼苗的目的。

5.根据权利要求4所述的一种以柠檬提取液为防褐化培养基的蝴蝶兰防褐化组培方法，其特征在于：所述移栽是指：

将消毒处理过的水苔用清水浸泡，然后用脱水机脱去水苔中多余的水分至水苔手紧握无水滴产生，待用；移栽时将苗的根系分开呈散射状，中间填充水苔，再用水苔包裹整个根系，然后将苗根部浸入营养液中，待水苔吸收营养液后再进行包苗，移栽。

6.根据权利要求2所述的一种以柠檬提取液为防褐化培养基的蝴蝶兰防褐化组培方法，其特征在于：所述外植体消毒是指：

从植株上剪下当年生嫩叶，自来水冲去泥沙，洗涤液浸泡10min并除去表面污垢，自来水冲洗3h，置于超净工作台上，体积浓度75％的酒精溶液浸泡35s，之后无菌水冲洗3次，再用体积浓度0.2％的HgCl₂溶液浸泡5-7min，无菌水冲洗8次，之后用500mg/L PVP浸泡4-8min转入培养皿中，吸干附着水分等待接入初代培养基。