[发明专利]奥硝唑在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及奥硝唑在制药领域新的用途，具体涉及奥硝唑在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用。

背景技术

奥硝唑用于治疗由脆弱拟杆菌、狄氏拟杆菌、卵园拟杆菌、多形拟杆菌、普通拟杆菌、梭状芽胞杆菌、真杆菌、消化球菌和消化链球菌、幽门螺杆菌、黑色素拟杆菌、梭杆菌、CO2噬织维菌、牙龈类杆菌等敏感厌氧菌所引起的多种感染性疾病。该化合物为硝基咪唑类衍生物，其发挥抗微生物作用的机理可能是通过其分子中的硝基，在无氧环境中还原成氨基或通过自由基的形成，与细胞成份相互作用，从而导致微生物的死亡。

奥硝唑的主要适应症：

1、感染，主要包括：

1)腹部感染：胞膜炎、腹内脓肿、肝脓肿等；

2)盆腔感染：子宫内膜炎、子宫肌炎、输卵管或卵巢脓肿、盆腔软组织感染、嗜血杆菌阴道炎等；

3)口腔感染：牙周炎、尖周炎、冠周炎、急性溃疡性龈炎等；

4)外科感染：伤口感染、表皮脓肿、褥疮溃疡感染、蜂窝组织炎、气性坏疽等；

5)脑部感染：脑膜炎、脑脓肿；

6)败血症、菌血症等严重厌氧菌感染等。

2、用于手术前预防感染和手术后厌氧菌感染的治疗。

3、治疗消化系统严重阿米巴虫病，如阿米巴痢疾、阿米巴肝脓肿等。

现有公开文献中尚未发现奥硝唑的其他药理作用。

发明内容

发明目的：本发明目的在于提供一种奥硝唑在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用。

技术方案：奥硝唑在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用。

优选地，所述肿瘤细胞为结肠癌细胞。

优选地，其中奥硝唑的浓度为1～5uM。

发明人通过细胞层面的实验研究发现，奥硝唑对肿瘤细胞的转移能力有一定的抑制作用。目前针对现有的适应症一般给药途径为静脉滴注(250ml：奥硝唑0.5g与氯化钠2.25g)，每次时间不少于30min，其中：

1.手术前后预防：成人手术前1-2小时静滴1g奥硝唑，术后12小时静滴0.5g，术后24小时静滴0.5g。

2.治疗厌氧菌引起的感染：成人起始剂量为0.5-1g，然后每12小时静滴0.5g。

3.治疗严重阿米巴病：起始剂量为0.5-1g，然后每12小时0.5g，连用3-6天。

4.儿童剂量为每日20-30mg/Kg体重，每12小时静滴一次，滴注时间30分钟。

本发明需要在现有的细胞层面实验基础上根据新的适应症疗效以及后续相关实验设计确定新的临床给药方法及剂量。

本发明通过将肿瘤细胞采集培养后，再利用药物刺激细胞，观察细胞形态、并定量分析细胞层的面积，即细胞能够与其他细胞接触的面积，从而判断肿瘤细胞的扩散能力。细胞层面积越大越有利于与其他细胞形成连接。细胞迁移需要内外因素的配合。外部的因素指的是细胞外的信号分子。内部因素则指细胞的信号传导系统和执行运动的细胞骨架和分子马达，还有参与粘着斑形成的各种分子。细胞外信号结合胞膜受体完成其使命后，需要细胞内信号分子接力，将运动信息进一步传给细胞迁移的执行单位——细胞骨架和分子马达。种类繁多的细胞内信号分子会相互作用，影响后述这两种分子的分布，结构和活性，达到精细调整细胞运动的目的。由此可见，肿瘤细胞的转移，与细胞本身以及细胞之间的关系紧密。

癌细胞与其同源正常组织相比，细胞间的粘着性降低，故癌细胞在体内容易分散和转移。在正常细胞外被中的纤粘连蛋白是一种细胞外粘着糖蛋白，它增强了细胞与细胞外基质间的粘着。癌细胞的纤粘连蛋白显著减少或缺失，钙粘蛋白合成发生障碍，从而破坏了细胞与基质之间和细胞与细胞之间的粘着，因此癌细胞具有易于侵润组织和转移的属性。癌细胞的面积的增大增强了各个细胞之间的接触面积更利于相互之间的粘连和附着。

虽然肿瘤细胞的转移是由多种因素共同形成导致的，但是以细胞层的面积，即细胞能够与其他细胞接触的面积作为细胞转移能力大小的依据，以此作为细胞间连接强度的测定的方法，具有成本低廉、操作简便、结果易判的优点，其表现出来的细胞面积增大是最容易直接观察辨别的，主要就是通过加药刺激后对细胞间连接分子E-cadherin蛋白质进行免疫染色，继而进行定量测定。细胞层面积越大越有利于与其他细胞形成连接。

本发明以为奥硝唑为实验对象，评估考量其在抑制肿瘤细胞转移的能力评价。具体以药物刺激前后细胞面积的变化为主要依据。