[发明专利]通过质谱法检测二羟基维生素D代谢物的方法

说明书

本申请是分案申请，原申请的申请日为2008年11月25日、申请号为200880124794.5(PCT/US2008/084709)、发明名称为“通过质谱法检测二羟基维生素D代谢物的方法”。

技术领域

本发明涉及二羟基维生素D代谢物的检测。在具体的方面，本发明涉及通过质谱法检测维生素D代谢物的方法。

背景技术

维生素D是在钙(Ca²⁺)动态平衡的正调节中具有重要生理学作用的基本营养物。维生素D可在皮肤中通过暴露于阳光从头合成或者它可从饮食中得以吸收。有两种形式的维生素D：维生素D₂(麦角钙化醇)和维生素D₃(胆钙化醇)。维生素D₃是由动物从头合成的形式。它还是在美国被添加到生产的牛奶产品和某些食品中的常用添加剂。饮食和内在合成的维生素D₃都必须经过代谢活化以产生生物活性代谢物。在人中，维生素D₃活化的初始步骤主要发生在肝脏中并且包括羟基化作用以形成中间代谢物25-羟基维生素D₃(25-羟基胆钙化醇；钙化醇；25OHD₃)。钙化醇是循环中维生素D₃的主要形式。循环25OHD₃然后由肾转化成1,25-二羟基维生素D₃(钙化醇；1,25(OH)₂D₃)，其一般被认为是具有最高生物学活性的维生素D₃的代谢物。

维生素D₂源自真菌和植物来源。一些非处方(over-the-counter)饮食添加剂包含麦角钙化醇(维生素D₂)，而不是胆钙化醇(维生素D₃)。Drisdol——美国可购得的唯一高效的处方形式的维生素D——是用麦角钙化醇配制的。在人中维生素D₂经历与维生素D₃类似的代谢活化途径，形成代谢物25-羟基维生素D₂(25OHD₂)和1,25-二羟基维生素D₃(1,25(OH)₂D₂)。在人中维生素D₂和维生素D₃长期被认为是生物学等价的，然而最近的报道表明这两种形式的维生素D在生物活性和生物利用率上可能具有差异(Armas等人,(2004)J.Clin.Endocrinol.Metab.89:5387-5391)。

维生素D——无活性的维生素D前体——的测量在临床环境下是很少的并且具有很小的诊断价值。相反，25-羟基维生素D₃和25-羟基维生素D₂(统称为25-羟基维生素D；“25OHD”)的血清水平是维生素D营养状况和某种维生素D类似物效力的有用指标。因此，25OHD的测量通常用于诊断和处理钙代谢疾病。在这方面，25OHD的低水平指示与疾病相关的维生素D缺乏，所述疾病诸如低血钙、低血磷酸盐、二级甲状旁腺功能亢进、碱性磷酸酶升高、成人骨软化和儿童软骨病。在维生素D中毒疑似患者中，25OHD水平升高使该疾病区别于引起高血钙的其它疾病。

1,25(OH)₂D的测量也被用于临床环境。例如，某些疾病状态诸如肾衰竭可通过循环1,25(OH)₂D水平的降低进行诊断，并且1,25(OH)₂D水平的升高可指示副甲状腺激素过多或者可能指示某些疾病诸如肉样瘤病或某些类型的淋巴瘤。