[发明专利]一种家蚕丝素蛋白溶液制备及鉴定方法有效
| 申请号： | 201510071886.3 | 申请日： | 2015-02-11 |
| 公开（公告）号： | CN104672316B | 公开（公告）日： | 2018-06-26 |
| 发明（设计）人： | 王晓沁;郑兆柱;郭少哲;大卫·李·卡普兰 | 申请（专利权）人： | 苏州丝美特生物技术有限公司;塔夫茨大学 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C07K1/34;C07K1/113;G01N33/68 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 李广 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市工业*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 家蚕丝素蛋白 溶液制备 丝素蛋白溶液 丝素溶液 脱胶蚕丝 脱胶 蛋白质变性剂 生物医学技术 家蚕蚕丝 浓度梯度 三元溶液 生物材料 丝胶蛋白 丝素蛋白 透析处理 用水透析 氯化钙 保存 复性 溶丝 制备 溶解 | ||
1.一种家蚕丝素蛋白溶液制备方法，其特征在于：依次包括以下步骤：
1)脱胶：将家蚕蚕丝脱胶除去外层的丝胶蛋白，得到脱胶蚕丝；
2)溶丝：使用含氯化钙三元溶液溶解脱胶蚕丝，得到丝素溶液；
3)复性：使用蛋白质变性剂溶液按浓度梯度由高至低依次透析处理所述丝素溶液后，再使用水透析处理，得到丝素蛋白溶液；所述蛋白质变性剂为尿素、SDS或盐酸胍；
4)保存：保存所述丝素蛋白溶液。
2.根据权利要求1所述的家蚕丝素蛋白溶液制备方法，其特征在于：所述蛋白质变性剂为尿素，所述蛋白质变性剂溶液的浓度梯度包括摩尔浓度为4M、2M和1M的尿素溶液，每次透析处理所述丝素溶液的时间为1～5小时。
3.根据权利要求1所述的家蚕丝素蛋白溶液制备方法，其特征在于：所述蛋白质变性剂为SDS，所述蛋白质变性剂溶液的浓度梯度包括质量份数为2％和1％的SDS溶液，每次透析处理所述丝素溶液的时间为1～5小时。
4.根据权利要求1所述的家蚕丝素蛋白溶液制备方法，其特征在于：所述蛋白质变性剂为盐酸胍，所述蛋白质变性剂溶液的浓度梯度包括摩尔浓度为2M和1M的盐酸胍溶液，每次透析处理所述丝素溶液的时间为1～5小时。
5.根据权利要求1所述的家蚕丝素蛋白溶液制备方法，其特征在于：所述含氯化钙三元溶液中包括摩尔比为1：8：2的氯化钙、水和乙醇，所述脱胶蚕丝按照浴比为1：10～1：50、温度为60～85℃、时间为0.5～24小时进行溶丝处理。
6.根据权利要求1所述的家蚕丝素蛋白溶液制备方法，其特征在于：所述步骤4)保存过程中，先将所述丝素蛋白溶液离心处理去除不溶物后，在4℃冰箱中保存。
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