[发明专利]rT3化学发光免疫检测试剂盒及其检测方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及体外诊断检测技术领域，特别是涉及一种rT3(反三碘甲状腺原氨酸)化学发光免疫检测试剂盒及其检测方法和应用。

背景技术

反三碘甲状腺原氨酸(rT3)又称3，3＇,5＇-三碘甲腺原氨酸，是正常人血清中存在的一种甲状腺激素，是T4(甲状腺素)在肝、肾、垂体及心肌等组织中，经5-脱碘酶脱去酪氨酸环上的一个碘而生成的。rT3在体内降解速度较快，其半寿期为30-60分钟。它在血液中含量甚微，生物活性很低，但在不同的生理及病理状况下，血清含量有显著区别，因此，测定血清中rT3水平在临床上仍有一定意义。例如：妊娠时，脐血及羊水rT3含量较高，能反映胎儿甲状腺功能状态。总体来说，血清中rT3浓度男女间无差异，从儿童到40岁之间随年龄增长呈下降趋势，而40岁以后又随年龄增长呈上升趋势。

具体来说，当rT3增高或降低，有助于以下几种情况的判断：

A，甲状腺功能亢进或减退症：甲亢时rT3升高，而且比T3，T4灵敏。当用抗甲状腺药物治疗时，T3降低较快，而rT3下降缓慢，当T3和rT3都正常，表示用药适当；若rT3和T4均低于正常，则表示用药过量。rT3的降低对于轻型或亚临床型甲状腺功能减退的判断有非常重要的意义。

B，甲状腺疾病：急性心肌梗塞，肝硬变、糖尿病、尿素症、脑血管病、胃癌等类疾病还可出现T3下降，故显示出T3/rT3比值降低。

C.替代治疗的观察：甲状腺机能减退症服用甲状腺素替代治疗后，rT3、T3均升高提示用量过大，而甲状腺功能减退症在使用抗甲亢药物后出现rT3下降，则提示药物用量过大，故rT3测定可用于监测用药。

D.药物引起的高rT3现象：使用乙胺碘呋酮、糖皮质激素、丙基硫氧嘧啶、心得胺等药物可出现高rT3现象，故rT3还可用于监测上述药物的使用。

目前，临床上测定血清反三碘甲状腺原氨酸(rT3)的方法主要有放射性免疫法、酶联免疫法等，而放射性免疫法及酶联免疫法存在诸多不足。如：传统的放射性免疫法或酶联免疫法方法检测时间长，同时主要依靠纯手工加样等系列繁琐操作，效率低，容易导致实验结果误差大；由于酶促反应不够彻底，且易受外部干扰因素影响，如温度、时间及材料浓度影响，因此检测时特异性低，灵敏度差，检测范围窄。并且，放射性免疫法还存在放射性污染、标记物半衰期短、对操作者具有放射性损伤等缺陷。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种rT3化学发光免疫检测试剂盒，该化学发光免疫检测试剂盒是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，具有灵敏度高，特异性好和检测范围宽的优点。

为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：

一种rT3化学发光免疫检测试剂盒，包括以下组分：

1)标记物体系：包括直接连接或间接连接标记示踪物的反三碘甲状腺原氨酸抗原或抗反三碘甲状腺原氨酸抗体；

2)磁性微球体系：包括相应的直接连接或间接连接抗反三碘甲状腺原氨酸抗体或反三碘甲状腺原氨酸抗原的磁性微球。

并且，当标记物体系包括直接连接或间接连接标记示踪物的反三碘甲状腺原氨酸抗原，则磁性微球体系包括直接连接或间接连接抗反三碘甲状腺原氨酸抗体的磁性微球；当标记物体系包括直接连接或间接连接标记示踪物的抗反三碘甲状腺原氨酸抗体，则磁性微球体系包括直接连接或间接连接反三碘甲状腺原氨酸抗原的磁性微球。

上述“直接连接”为直接结合的连接，上述“间接连接”为通过生物素和链霉亲和素，或异硫氰酸荧光素和抗异硫氰酸荧光素抗体等能够相互结合的搭桥物以间接结合的方式连接。

本发明提供了一种rT3化学发光免疫检测试剂盒，利用化学发光免疫的方法来检测rT3，具有灵敏度高，特异性好和检测范围宽的优点，并且，本发明中的试剂盒，以磁性微球作为检测中的固相体系，既能在与待测物反应时均匀的悬浮于反应体系中，与待测物更好的结合，又能在分离时外加磁场即可方便的实现分离，具有操作方便的特点。更为重要的是，该检测试剂盒能与常规技术中的化学发光分析仪配合使用，实现全自动化检测，避免了人为因素可能导致的实验误差，并提高了分析效率。

在其中一个实施例中，所述2)磁性微球体系中，所述间接连接抗反三碘甲状腺原氨酸抗体的磁性微球由生物素标记的抗反三碘甲状腺原氨酸抗体，和链霉亲和素包被的磁性微球组成；或所述间接连接抗反三碘甲状腺原氨酸抗体的磁性微球由异硫氰酸荧光素标记的抗反三碘甲状腺原氨酸抗体，和抗异硫氰酸荧光素抗体包被的磁性微球组成。