[发明专利]检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针、检测方法、DNA和表达载体在审
| 申请号： | 201510072905.4 | 申请日： | 2015-02-10 |
| 公开（公告）号： | CN104861073A | 公开（公告）日： | 2015-08-26 |
| 发明（设计）人： | 王大平;梁宇杰;段莉 | 申请（专利权）人： | 深圳市第二人民医院 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12Q1/37;C12N15/62 |
| 代理公司： | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人： | 张全文 |
| 地址： | 518000 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 mmp 13 活性 fret 融合 荧光 探针 方法 dna 表达 载体 | ||
1.一种检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针，其特征在于，包括FRET荧光供体蛋白、FRET荧光受体蛋白；
所述FRET荧光供体蛋白和FRET荧光受体蛋白之间通过MMP-13特异性识别降解多肽底物连接。
2.如权利要求1所述的检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针，其特征在于，所述MMP-13特异性识别降解多肽底物具有序列表SEQ.ID.No.1的氨基酸序列。
3.如权利要求1或2所述的检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针，其特征在于，所述FRET荧光供体蛋白具有序列表SEQ.ID.No.2氨基酸序列；
及/或，所述FRET荧光受体蛋白具有序列表SEQ.ID.No.3氨基酸序列.
4.如权利要求1或2所述的检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针，其特征在于，所述FRET荧光供体蛋白与MMP-13特异性识别降解多肽底物两者之间通过连接元件连接；
及/或述FRET荧光受体蛋白与MMP-13特异性识别降解多肽底物两者之间通过连接元件连接；
其中，所述连接元件为长度3～8个氨基酸残基的多肽。
5.如权利要求4所述的检测MMP-13活性的FRET融合荧光探针，其特征在于，所述连接元件为具有序列表SEQ.ID.No.4氨基酸序列的寡肽。
6.一种MMP-13活性的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
获取待测蛋白样品；
将所述待测蛋白样品与权利要求1至5任一项所述的FRET融合荧光探针进行孵育，并检测荧光信号。
7.一种DNA，用于编码权利要求5所述的FRET融合荧光探针，其特征子在于，所述DNA具有SEQ.ID.No.6的核苷酸碱基序列。
8.一种表达权利要求7所述的DNA的表达载体。
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