[发明专利]一种生物组织RNA保护试剂及其制备方法和应用有效
申请号: | 201510073041.8 | 申请日: | 2015-02-12 |
公开(公告)号: | CN104673717B | 公开(公告)日: | 2017-11-28 |
发明(设计)人: | 吕昌龙;翟景波;高植鹏;王大南;姜雪峰 | 申请(专利权)人: | 中国医科大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/16;C12N5/00;A01N1/02;A01N3/00 |
代理公司: | 北京万科园知识产权代理有限责任公司11230 | 代理人: | 刘俊玲,张亚军 |
地址: | 110122 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 组织 rna 保护 试剂 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种RNA保护试剂,其特征在于,它含有以下组分:15~20mM柠檬酸钠、5~10mM乙二胺四乙酸、40~55%W/V硫酸铵、10~20mM二硫苏糖醇、8~15μM 1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖和0.001~0.010%V/V甘油;
所述的RNA保护试剂pH值在4.3~5.3之间。
2.根据权利要求1所述的RNA保护试剂,其特征在于,它含有以下组分:15~18mM柠檬酸钠、6~8mM乙二胺四乙酸、45~50%W/V硫酸铵、12~18mM二硫苏糖醇、8~12μM 1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖和0.004~0.006%V/V甘油。
3.根据权利要求1所述的RNA保护试剂,其特征在于,它含有以下组分:17mM柠檬酸钠、7mM乙二胺四乙酸、48%W/V硫酸铵、14mM二硫苏糖醇、10μM 1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖和0.005%V/V甘油。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的RNA保护试剂,其特征在于,所述的1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖提取自白芍,HPLC纯度≥98%。
5.根据权利要求1所述的RNA保护试剂,其特征在于,所述的RNA保护试剂pH值在5.0~5.3之间。
6.根据权利要求1所述的RNA保护试剂,其特征在于,所述的RNA保护试剂pH值为5.2。
7.制备权利要求1所述的RNA保护试剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:在水中加入(NH4)2SO4,搅拌使其完全溶解,然后依次加入柠檬酸钠水溶液、EDTA水溶液、DTT水溶液、PGG水溶液和甘油,搅拌均匀后调pH至4.3~5.3,用水定容,最终使各组分达到所述的比例,得到所述的RNA保护试剂。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的水为超纯水。
9.权利要求7所述的方法,其特征在于,使用硫酸调pH。
10.权利要求1所述的RNA保护试剂在细菌培养、酵母培养、植物组织保存、动物组织保存、细胞培养或悬浮细胞保存过程中的应用。
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