[发明专利]一种花生慢生型根瘤菌剂，其制备方法和用途

权利要求书

1.一种慢生型根瘤菌剂，其中包含有效活菌数>＝5.0亿/ml的慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)和圆明慢生根瘤菌(Bradyrhizobium yuanmingense)的组合物，磷酸氢二钾0.1－1重量％，硫酸镁0.05－0.5重量％，氯化钠0.05－0.5重量％，氯化铁0.05－0.3重量％，以及余量的水，其中慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)与圆明慢生根瘤菌(Bradyrhizobium yuanmingense)的配合体积比为100：1～1：100。

2.根据权利要求1的根瘤菌剂，其中慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)与圆明慢生根瘤菌的配合体积比为1：1。

3.根据权利要求1或2的慢生型根瘤菌剂的制备方法，其特征在于发酵培养慢生型根瘤菌，将发酵好的菌液与磷酸氢二钾0.1－1重量％，硫酸镁0.05－0.5重量％，氯化钠0.05－0.5重量％，氯化铁0.05－0.3重量％，以及余量的水混合，并在无菌的条件下分装密封。

4.根据权利要求3的制备方法，其特征在于：

1)、培养基培养，使用接种环将慢生型根瘤菌斜面菌种接种于液体培养基中；然后在温度25－30℃，转数180—200转/分钟的恒温摇床中培养7－9天；

2)、种子罐培养，按8－12％的接种量，将菌种接种到种子罐，温度25-30℃，通气量0.2－0.8k/s，搅拌速度150－200转/分钟，培养5－7天；

3)、发酵罐培养，按接种量10－20％，将种子罐中培养好的菌种接种到发酵罐中；温度28℃－30℃，通气量0.2－0.8k/s，搅拌速度150－200转/分钟，培养5－7天；

4)、配制菌剂，将发酵好的菌液，与灭菌后的菌剂中包含的上述缓冲盐水溶液混合，配制成有效活菌数>＝5.0亿/ml菌液，并在无菌的条件下分装。

5.根据权利要求1或2的慢生型根瘤菌剂的使用方法，其特征在于将根瘤菌剂与花生种子一起拌种，然后阴干，在12小时内播种。

6.根据权利要求5的使用方法，其特征在于对每公斤的花生使用有效活菌≥5.0亿/mL的根瘤菌菌液20—30mL。

7.根据权利要求1或2的一种慢生型大豆根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)和圆明慢生根瘤菌 (Bradyrhizobium yuanmingense)的组合物的用途，其特征在于将有效活菌数>＝5.0亿/ml的慢生型根瘤菌应用到花生上。

8.根据权利要求7的用途，其特征在于将上述根瘤菌与花生种子一起拌种，然后阴干，在12小时内播种，对每公斤的花生使用有效活菌≥5.0亿/mL的根瘤菌菌液20—30mL。

9.根据权利要求8的用途，其特征在于对每公斤的花生使用有效活菌≥5.0亿/mL的根瘤菌菌液25mL。