[发明专利]一种猪伪狂犬病病毒PRV-YF株及其应用

权利要求书

1.一种伪狂犬病病毒野生毒株YF(Pseudorabies virus strain PRV-YF)，其特征在于：保藏号为CCTCC No：V201502。

2.如权利要求1所述的伪狂犬病病毒野生毒株YF(Pseudorabies virus strain PRV-YF)在制备猪伪狂犬病毒灭活疫苗中的应用。

3.一种猪伪狂犬病病毒灭活疫苗，其特征在于：包括佐剂和含有灭活后的权利要求1所述的伪狂犬病病毒野生毒株YF(Pseudorabies virus strain PRV-YF)的病毒液。

4.一种如权利要求3所述的猪伪狂犬病病毒灭活疫苗的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

1)培养如权利要求1所述的伪狂犬病病毒野生毒株YF(Pseudorabies virus strainPRV-YF)，获得病毒液；

2)在病毒液中加入灭活剂将病毒灭活，然后加入终止剂终止灭活，获得PRV-YF株灭活病毒液；

3)制备水相和油相，乳化，即得猪伪狂犬灭活疫苗；

其中，所述步骤3)具体包括以下步骤：

A.水相制备：取步骤2)制得的PRV-YF株灭活病毒液加入终浓度为0.75％的吐温-80，边加边搅拌，直到吐温-80彻底溶解，制得水相；

B.油相制备：取白油141.75份，加入7.5份司本80，充分混匀，121℃下灭菌30min，冷却至室温备用，制得油相；

C.将上述的油相和水相按1.5∶1的比例乳化：将水相缓慢加入油相，均质1～3min后剪切，制成均匀乳剂，即为猪伪狂犬病灭活疫苗。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于:在步骤1)中所制得的病毒液的病毒含量不低于10^7.0TCID₅₀/ml。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于:步骤2)中所述的灭活剂为二乙烯亚胺；按w/v计，向病毒液中加入的二乙烯亚胺占病毒液总量的0.1％～1％。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：灭活时间为12～60h；灭活温度为37℃。

8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤2)中所述的终止剂为硫代硫酸钠；按w/v计，向病毒液中加入的硫代硫酸钠占病毒液总量的0.1％～5％。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：按w/v计，向病毒液中加入的硫代硫酸钠占病毒液总量的0.5％～5％。