[发明专利]榅桲子提取物的制备方法及降糖用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种榅桲子提取物的制备方法及其降血糖用途。

背景技术

榅桲是蔷薇科(Rosaceae)榅桲属(Cydonia)植物，它是一种用途广泛的药食两用植物，主要药理活性有抗氧化、抗增殖、抗溶血、抗过敏、抑菌杀菌、抗病毒等，有较高的研究和药用价值。在我国民族药中，榅桲果、种子、叶等均可入药，其中榅桲子可以清除胃肠干热、生津止咳，用于咳嗽、肺结核。Mustafa Aslan等对榅桲叶子乙醇提取物进行了降糖作用研究，发现它能使患糖尿病大鼠血糖水平下降33.8％，具有降血糖活性。本所哈及尼莎等申请了关于榅桲果实降糖的专利,并获得授权。虽然国内外已有关于榅桲化学成分及用途的报道，但未见到关于榅桲子降糖的报道，其调节血糖的有效部位或有效成分尚不明确。

糖尿病是由于体内胰岛素紊乱导致的，一组以高血糖为特征的代谢性疾病。随着人们生活水平的提高，生活方式的改变和老龄化进度的加速，我国糖尿病的患病率呈快速上升趋势，尤其是非胰岛素依赖型糖尿病(即Ⅱ型糖尿病)人数成倍增长。Ⅱ型糖尿病主要是由于胰岛素分泌不足和胰岛素抵抗两个病因引起。无论是欧美发达国家还是发展中国家如中国，糖尿病控制状况均不容乐观。从中药有效成分中寻找新型降糖药物是目前国内糖尿病研究的热点之一，已见报道具有降糖疗效的活性成分多达几十种，从众多中药有效成分中跟踪筛选出具有降糖作用的活性成分，进一步指导植化分离，是新型降糖药物开发的关键。

已有研究表明蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B,protein tyrosine phosphatase 1B)可减弱胰岛素及瘦素信号转导，引起脂代谢异常，是导致胰岛素抵抗和肥胖的关键环节。研究报道，敲除蛋白质酪氨酸磷酸酶1B基因后会明显改善肥胖且瘦素抵抗的小鼠的外周胰岛素抵抗和动脉血管功能。蛋白质酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)在胰岛素信号通路中起着重要的负调控作用，是治疗II型糖尿病的重要靶点之一。此外，PI3K(磷脂酰肌醇-3激酶)/AKT(丝/苏氨酸激酶)信号通路是胰岛素发挥降糖的生理功能的重要途径。为了合理开发利用新疆榅桲药材资源，我们利用植化方法获得榅桲子提取物，并对其进行体外蛋白质酪氨酸磷酸酶1B活性筛选和胞内分子水平的分析，结果表明，通过本发明所述方法制备得到的榅桲子提取物在体外可以抑制蛋白质酪氨酸磷酸酶1B，细胞内通过激活磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸激酶(PI3K/AKT)信号通路，增强胰岛素生物效应，从而提高肌细胞的糖原合成，降低血糖浓度。

发明内容

本发明目的在于提供一种榅桲子提取物的制备方法及降糖用途，该方法是从维药榅桲子中采用有机溶剂提取，大孔树脂分离纯化获得，经初步的活性筛选试验证明：通过本发明所述的方法获得的榅桲种子提取物具有蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)抑制作用，促进肌细胞的葡萄糖吸收利用，并证实通过磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸激酶(PI3K/AKT)信号通路来改善胰岛素抵抗，从而降低血糖。本发明所述方法获得的榅桲子提取物可用于预防治疗糖尿病的药物或保健品的应用。

本发明所述的一种榅桲子提取物的制备方法，按下列步骤进行：

a、将榅桲子原料进行清洗、粉碎，用石油醚按常规方法进行脱脂，得到脱脂榅桲子；

b、将步骤a中得到脱脂榅桲子在室温冷浸3次，每次1-3天，或在温度30-80℃的条件下，用浓度为30-95％乙醇加热回流1-3次，每次1-3h，乙醇与脱脂榅桲子的重量体积比为1:3-1:30，最终收集得到回流液；

c、将步骤b回流液浓缩除醇后，加入预先处理好的大孔树脂柱，用水冲洗至还原糖反应阴性，再用乙醇洗脱，收集流出液，浓缩，即得到具有降血糖活性的榅桲种子提取物。

步骤c所用的大孔树脂型号为HPD100、HPD300、AB-8、D101、X-5。

所述的方法获得的榅桲种子提取物在制备糖尿病药物筛选靶点-蛋白质酪氨酸磷酸酶1B的抑制作用。

所述的方法获得的榅桲子提取物在制备治疗糖尿病的药物中的用途。

所述的方法获得的榅桲子提取物在制备治疗糖尿病的保健品或其他功能性食品的中的用途。

附图说明

图1为本发明不同浓度榅桲子提取物对蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP1B)的抑制率图；

图2为本发明不同浓度榅桲子提取物对L6肌细胞葡萄糖消耗的影响图，其中为非胰岛素组，为胰岛素组；

图3为本发明不同浓度榅桲子提取物对L6肌细胞乳酸量的影响图，其中为非胰岛素组，为胰岛素组；