[发明专利]鸭痘病毒的实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针有效
| 申请号： | 201510076187.8 | 申请日： | 2015-02-13 |
| 公开（公告）号： | CN104611468B | 公开（公告）日： | 2017-01-04 |
| 发明（设计）人： | 郑敏;曹慧慧;孙文超;韦显凯;蒙振亩;郑列丰;苏娇秀;梁晟;李军 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区动物疫病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 | 代理人： | 罗保康 |
| 地址： | 530001 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 痘病毒 实时 荧光 pcr 检测 方法 引物 探针 | ||
【权利要求书】：
1.一种鸭痘病毒的实时荧光PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）针对鸭痘病毒P4b基因设计能够检测鸭痘病毒的特异性引物和探针序列；
（2）采用FAM、VIC、HEX、JOE、NED、TAMRA、CY3、ROX或CY5任意一种荧光素标记探针序列；
（3）将用于检测鸭痘病毒的引物和探针置于同一反应管中，使用荧光PCR扩增仪进行实时荧光PCR反应。
2.根据权利要求1所述的鸭痘病毒的实时荧光PCR检测方法，其特征在于：步骤（1）所述的特异性引物对序列为：上游引物：5’-TGCTAAACAACAAAGGCCTATGC-3’；下游引物：5’-TCCAGAATCTGGGACACTTTTACA-3’。
3.根据权利要求1所述的鸭痘病毒的实时荧光PCR检测方法，其特征在于：步骤（1）所述的特异性探针序列为：5’-CTTCGCAGTAGCAAACAAAAGCCCGAT-3’。
4. 根据权利要求1所述的鸭痘病毒的实时荧光PCR检测方法，其特征在于：步骤（3）中所述实时荧光PCR检测的反应程序为：预变性95℃ 5min; 然后95℃ 30sec, 60℃ 30sec循环40次。
5.一种用于鸭痘病毒的检测方法，包括权利要求1所述的针对鸭痘病毒检测的实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针。
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