[发明专利]一种基于微载体的微流控细胞培养系统及其操控方法在审
申请号: | 201510077359.3 | 申请日: | 2015-02-13 |
公开(公告)号: | CN104673669A | 公开(公告)日: | 2015-06-03 |
发明(设计)人: | 张荣标;孙健;任作为 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
主分类号: | C12M3/02 | 分类号: | C12M3/02;C12M1/38;C12M1/36;C12M1/34;C12N5/02 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 212013 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 载体 微流控 细胞培养 系统 及其 操控 方法 | ||
1.一种基于微载体的微流控细胞培养系统,具有一个微流控芯片(2),其特征是:在微流控芯片(2)上构造出两个相同的三角形的培养仓(6、7),两个培养仓(6、7)的一个顶点相接且在相接处设有一个微阀(5),两个培养仓(6、7)相对于微阀(5)对称,吸附细胞的磁性微载体(22)位于两个培养仓(6、7)内;每个培养仓(6、7)均通过一个进液管连接一个注射泵(18、19),每个培养仓(6、7)均通过一个出液管连接一个真空泵(10、11),在每个进液管上设有一个进液管开关阀门(14、15),在每个出液管上设有一个出液管开关阀门(3、4);在每个培养仓(6、7)的周围设置一个用以探测磁性微载体(22)位置的巨磁阻传感器(21、20);在每个培养仓(6、7)旁侧设置一个控制磁性微载体(22)运动轨迹的磁场控制模块(1、12);一个微阀(5)、两个所述进液管开关阀门(14、15)、两个所述出液管开关阀门(3、4)、两个所述磁场控制模块(1、12)、两个所述巨磁阻传感器(21、20)、两个所述真空泵(10、11)以及两个所述注射泵(18、19)分别连接于控制器(30)。
2.根据权利要求1所述基于微载体的微流控细胞培养系统,其特征是:在微流控芯片(2)的下部固定设有包括加热装置和温度传感器的温度控制单元总成(13),温度控制单元总成(13)连接控制器(30)。
3.根据权利要求1所述基于微载体的微流控细胞培养系统,其特征是:在三角形的培养仓(6、7)的第二个顶点处各设进液口(25)、第三个顶点处设出液口(23),进液管连接进液口(25),出液管连接出液口(23)。
4. 根据权利要求1所述基于微载体的微流控细胞培养系统,其特征是:磁场控制模块(1、12)由若干不同角度的线圈绕组构成,控制器(30)给不同角度的线圈绕组通电以产生不同角度的磁场,驱动磁性微载体(22)在培养仓(6、7)沿圆周轨迹运动以及在两个培养仓(6、7)之间转移。
5.根据权利要求1所述基于微载体的微流控细胞培养系统,其特征是:微流控芯片(2)水平放置,微流控芯片(2)是透明芯片。
6.一种如权利要求1所述基于微载体的微流控细胞培养系统的操控方法,其特征是依序按以下步骤:
1)将磁性微载体(22)和37摄氏度的培养液混合后加入注射泵(18、19)中,控制器(30)控制打开相应的进液管开关阀门(14、15),由注射泵(18、19)将混合液注入到培养仓(6、7)中,使培养仓(6、7)中充满混合液;完成后关闭相应的进液管开关阀门(14、15)和注射泵(18、19);当培养仓(6、7)旁的巨磁阻传感器(21、20)感应到磁性微载体(22)的存在向控制器(30)反馈高电平时,完成对培养仓(6、7)的进样;
2)控制器30启动磁场控制模块(1、12),由磁场控制模块(1、12)控制磁性微载体(22)在培养仓(6、7)内作匀速圆周运动;
3)当培养仓(6、7)中的培养液需要更换时,控制器(30)开启微阀(5),两培养仓(6、7)连通,由相应的磁场控制模块(1)控制需要更换营养液的第一个培养仓(6)内的磁性微载体(22)运动,从第一个培养仓(6)内通过微阀5进入第二个培养仓(7)内;当第一个培养仓(6)旁的巨磁阻感应器(21)感应不到磁性微载体(22)的信号,输出由高电平跳变到低电平,同时第二个培养仓(7)旁的巨磁阻感应器(20)感应到磁性微载体(22)的信号,输出由低电平跳变到高电平时,磁性微载体(22)完成从第一个培养仓(6)到第二个培养仓(7)的转移;
4)控制器(30)打开连接第一个培养仓(6)的出液管上的第一个出液管开关阀门(3),启动相应的第一个真空泵(10),将第一个培养仓(6)中的培养液泵出,之后关闭第一个出液管开关阀门(3)和第一个真空泵(10)并打开连接第一个培养仓(6)的进液管上的第一个进液管开关阀门(14),启动相应的第一个注射泵(18),将新鲜的培养液注入到第一个培养仓(6)中,完成后关闭第一个进液管开关阀门(14)和第一个注射泵(18)。
7.根据权利要求6所述的操控方法,其特征是:步骤2)中,控制器(30)启动在微流控芯片(2)下部的温度控制单元总成(13),温度传感器将培养仓(6、7)的温度信息反馈给控制器(30),当温度低于37摄氏度时,控制器(30)控制加热装置工作,使培养仓(6、7)内的温度保持在细胞培养的最佳温度37摄氏度。
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