[发明专利]含人参皂甙的疫苗稀释剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种含人参皂甙疫苗稀释剂的制备方法和用途。

背景技术

我国是世界第一养殖业大国，年出栏猪、牛、羊约10亿只(头)(1)。近年来由于动物传染病肆虐，造成畜禽大量死亡，已经严重危害养殖业的健康发展，规模化养殖程度提高后，疫病更易传播，动物疫病防制的任务十分艰巨。为减少动物的发病率和死亡率，国家规定对某些动物传染病实行强制性疫苗免疫。但近年来养殖业疫苗免疫失败的现象时有发生，给动物免疫注射疫苗后检测不到足够水平的抗体，无法阻止疾病的暴发，给养殖户带来严重的经济损失。例如，朱安民等人对95头猪二次注射口蹄疫疫苗后血清抗体检测表明，免疫合格率仅有64％(2)；陈彪等人分析了1081份口蹄疫疫苗免疫猪的血清后发现，仅有41.4％的猪达了抗体合格水平(3)。因此，提高疫苗的免疫效果，有效预防传染病的发生在养殖业具有重要意义。

在动物疫苗中添加佐剂是提高疫苗免疫效果的措施之一。目前给动物注射的疫苗主要有弱毒疫苗和灭活疫苗两大类。通过添加佐剂的方法来提高疫苗的免疫效果主要见于灭活疫苗，如灭活口蹄疫病毒油佐剂疫苗等。冻干弱毒疫苗由于免疫后抗体的持续时间长而在养殖业被广泛使用，如猪伪狂犬弱毒疫苗、传染性法氏囊病弱毒冻干疫苗、猪瘟冻干疫苗、新城疫Ⅳ系弱毒疫苗等。这类疫苗给动物免疫接种前需要用稀释液稀释后才能使用。常用的疫苗稀释剂有氢氧化铝铝胶生理盐水溶液和生理盐水。铝胶溶液的缺点是仅仅对细胞免疫反应有提高作用、注射部位局部刺激反应大和冰冻保存容易破坏铝胶胶体的稳定性使其丧失佐剂功能；生理盐水稀释剂无免疫增强作用。

硫柳汞，别名硫汞柳酸钠，是一种含汞的有机化合物，长期以来一直被广泛用做生物制品及药物制剂包括许多疫苗的防腐剂，以抑制微生物在药剂中生长。即，目前人们仅知道在疫苗中使用硫柳汞的目的是为了防腐。

所涉及的参考文献如下：

(1)《中国农业年鉴2013》，第241-242,257页；

(2)朱安民，王国防，姚战生，刘卫峰，猪口蹄疫疫苗免疫后跟踪抗体检测试验及建议，畜禽业，2014,(307)：5-7；

(3)陈彪，蔡扩军，李爱巧，施远翔，陈发喜，王六合，李建玲，左勇，乌鲁木齐市猪O型口蹄疫不同疫苗免疫效果监测与分析，当代畜牧，2014，(5)：43-45)。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种含人参皂甙的疫苗稀释剂，该疫苗稀释剂能克服现有疫苗稀释剂对细胞免疫反应作用弱、无免疫增强作用等缺点。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种含人参皂甙的疫苗稀释剂，其由以下重量含量的成分组成：0.004％～0.012％的人参茎叶皂甙(GSLS)或人参皂甙(GS)、0.001％～0.01％的硫柳汞(硫柳汞钠盐)，余量为生理盐水。

本发明的制备法为：将上述含量的人参茎叶皂甙(GSLS)或人参皂甙(GS)以及硫柳汞溶解于生理盐水，经过0.22μm滤膜过滤除菌，所得的无菌溶液即为含人参皂甙的疫苗稀释剂。

作为本发明的含人参皂甙的疫苗稀释剂的改进：该疫苗稀释剂的pH值为6～8；即，本发明溶液配制后产生的pH约为7。人参皂甙和硫柳汞在该中性溶液中比较稳定，活性较强。

作为本发明的含人参皂甙的疫苗稀释剂的进一步改进：人参茎叶皂甙或人参皂甙的含量为0.006％，硫柳汞的含量为0.01％。

备注说明：生理盐水，是含0.85～0.9％氯化钠的水溶液，和哺乳动物血浆是等渗的；此为常规技术。

硫柳汞钠盐(Merthiolate sodium，C₉H₉HgNaO₂S，相对分子量404.30)分子结构式如下：

采用本发明的稀释剂稀释疫苗后注射动物可以大幅度提高疫苗诱导的细胞和体液免疫反应，减少注射部位的局部刺激，且可以冰冻保存，延长稀释剂的贮存期。由于稀释剂的主要成分之一硫柳汞具有防腐功效，在工业制备疫苗稀释剂时无需额外加入的防腐剂防止产品长霉。

综上所述，本发明解决了如下技术问题：(1)现有铝胶疫苗稀释剂主要促进体液免疫反应，而对细胞免疫反应的效果弱；(2)现有铝胶稀释剂引起的注射部位局部刺激反应大；(3)现有的铝胶稀释剂疫苗不能冰冻保存；即，性质不稳定；(4)现有的稀释剂无免疫增强作用。