[发明专利]异源和同源纤维素酶表达体系在审
申请号: | 201510078857.X | 申请日: | 2008-06-05 |
公开(公告)号: | CN104726350A | 公开(公告)日: | 2015-06-24 |
发明(设计)人: | B·S·鲍尔;E·A·拉雷纳斯 | 申请(专利权)人: | 丹尼斯科美国公司 |
主分类号: | C12N1/15 | 分类号: | C12N1/15;C12N15/56;C12N9/42;C12R1/885 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 凌立;黄革生 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 同源 纤维素酶 表达 体系 | ||
1.丝状真菌,其包含:
编码第一异源多肽的第一多核苷酸,
编码第二异源多肽的第二多核苷酸,和
编码同源多肽的第三多核苷酸,
其中所述丝状真菌能够表达所述第一异源多肽和第二异源多肽与同源多肽,并且其中所述第一异源多肽和第二异源多肽与同源多肽形成功能性混合物。
2.权利要求1的丝状真菌,其中所述第一多核苷酸与第一启动子有效连接。
3.权利要求1的丝状真菌,其中所述第二多核苷酸与第三多核苷酸融合,并且其中所述第二和第三多核苷酸与第二启动子有效连接。
4.权利要求1的丝状真菌,其中所述第一多核苷酸与编码同源多肽的基因的固有启动子有效连接。
5.权利要求1的丝状真菌,其中所述第二多核苷酸与第三多核苷酸融合,并且其中所述第三多核苷酸与编码同源多肽的基因的启动子有效连接。
6.权利要求1的丝状真菌,其中所述第二多核苷酸与第三多核苷酸融合以形成编码融合蛋白的多核苷酸,其中所述融合蛋白包含通过接头隔开的第二异源多肽和同源多肽。
7.权利要求6的丝状真菌,其中所述融合蛋白还包含切割位点。
8.权利要求1的丝状真菌,其还包含编码选择性标记的第四多核苷酸。
9.权利要求1的丝状真菌,其还包含编码第三异源多肽的第四多核苷酸,其中所述丝状真菌能够表达第三异源多肽。
10.权利要求1的丝状真菌,其中所述第一异源多肽是经修饰的同源多肽。
11.权利要求1的丝状真菌,其还包含编码第三异源多肽的第四多核苷酸,其中所述第一异源多肽和第二异源多肽是经修饰的同源多肽。
12.权利要求1的丝状真菌,其中所述第一异源多肽、第二异源多肽或同源多肽是酶。
13.权利要求1的丝状真菌,其中所述第一异源多肽、第二异源多肽或同源多肽是纤维素酶。
14.权利要求1的丝状真菌,其中所述功能性混合物是纤维素酶的混合物。
15.权利要求1的丝状真菌,其中所述第一异源多肽、第二异源多肽或同源多肽是选自以下的纤维素酶:外切纤维二糖水解酶、内切葡聚糖酶和β-葡糖苷酶。
16.权利要求1的丝状真菌,其中所述第一异源多肽是外切纤维二糖水解酶,且第二异源多肽是内切葡聚糖酶。
17.权利要求1的丝状真菌,其中所述第一异源多肽是选自GH家族5、6、7、9和48的外切纤维二糖水解酶,并且其中所述第二异源多肽是选自GH家族5、6、7、8、9、12、17、31、44、45、48、51、61、64、74和81的内切葡聚糖酶。
18.权利要求1的丝状真菌,其中所述第一异源多肽是外切纤维二糖水解酶,第二异源多肽是内切葡聚糖酶,并且其中所述同源多肽是外切纤维二糖水解酶。
19.权利要求1的丝状真菌,其中第一异源多肽是第一外切纤维二糖水解酶,第二异源多肽是内切葡聚糖酶,同源多肽是第二外切纤维二糖水解酶,且其中第一外切纤维二糖水解酶和第二外切纤维二糖水解酶对应于相同的纤维二糖水解酶成员。
20.权利要求1的丝状真菌,其中所述丝状真菌选自曲霉属、枝顶孢属、短梗霉属、白僵菌属、头孢霉属、拟蜡菌属、毛壳菌属、拟青霉、Chrysosporium、麦角菌属、旋孢腔菌属、隐球酵母属、黑蛋巢菌属、内座壳属、镰孢属、Gilocladium、腐质霉属、Magnaporthe、毁丝霉属、漆斑菌属、毛霉属、脉孢菌属(Neurospora)、Phanerochaete、柄孢壳属、拟青霉属、青霉属、Pyricularia、根毛霉属、根霉属、裂褶菌属、壳多孢属、踝节菌属、木霉属、Thermomyces、嗜热子囊菌属、梭孢壳属、Tolypocladium、发癣菌属、栓菌(Trametes)和侧耳(Pleurotus)。
21.权利要求1的丝状真菌,其中所述丝状真菌是里氏木霉,并且其中第一异源多肽是灰腐质霉CBHI,第二异源多肽是解纤维热酸菌内切葡聚糖酶1,并且其中同源多肽是里氏木霉CBHI。
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