[发明专利]一种适配体功能化磁性纳米材料吸附双酚A检测回收率的方法

说明书

技术领域

本发明属于检测有机物的方法，具体涉及一种DNA作为吸附适配体的检测双酚A的方法——一种适配体功能化磁性纳米材料吸附双酚A检测回收率的方法。

背景技术

双酚A[2,2-bis(4-hydroxyphenol)propane,BPA]是生产聚碳酸酯和环氧树脂等多种高分子材料的主要原料，也可用于抗氧剂、涂料、农药等精细化工品的生产。食品中双酚A残留主要是通过食品原材料和食品包装：

(1)双酚A在环境中难以降解，广泛存在于自然界中，尤其存在于环境水和塑料制品中，并在生物体内中富集，通过食物链进入我们的食品当中。

(2)由于双酚A是脂溶性的，因此在含脂肪较高的罐头等制品中，双酚A还可通过食品包装容器和塑料薄膜渗入食品中。

(3)含有BPA的物品经反复使用或暴露于高热环境也会导致BPA浸出，进而被人体摄入。

因此BPA无处不在，从矿泉水瓶、医疗器械到食品包装的内里，都有它的身影。

双酚A可通过皮肤、呼吸道、消化道吸收而危害人体，会引发心脏病、癌症和发育问题，对机体产生广泛的影响，严重威胁着人类健康。现在多个国家对食品及食品接触材料中双酚A的含量均有严格的限制。在欧盟，双酚A在食品接触材料的迁移限量为3μg/g。我国规定双酚A的人体每日摄入量不能超过0.05μg/g。

目前，国内外已报道对双酚A的检测方法主要包括紫外可见分光光度法、荧光分析法、电化学分析方法、气相色谱法(GC)、气-质联用法(GC-MS)、液相色谱法(LC)、液-质联用法(HPLC-MS)，此外还有化学发光法、酶联免疫法等其他的分析法。分光光度法和荧光分光光度仪器设备成本低，操作步骤简单，但检测方法的灵敏度相对偏低；电化学分析法具有成本低，易于操作等优点。但是BPA在裸电极上电化学响应差，且造成电极表面钝化，需对电极进行修饰实现增敏和抗污染；色谱法对样品的前处理过程要求严格，分析繁琐费时，常用的预处理方法有液-液萃取(LLE)和固相萃取(SPE)法，这两种方法具有回收率高、重复性好等优点，但也存在有机试剂耗费量大、操作步骤繁琐、耗费时间、对双酚A不具有选择萃取性等缺点。而且大多采用大量挥发性有机溶剂萃取，不但会污染环境，而且影响实验人员健康。

磁性纳米材料是20世纪50年代开发研制出的一种新型功能性材料，通常为磁性元素如铁，钴和镍及其氧化物，其中氧化铁磁性纳米材料的应用最为广泛。磁性纳米材料具有表面效应、小尺寸效应、量子效应、偶联容量高、良好的磁导向性、生物相溶性和生物降解性等，可结合多种生物功能分子(酶、DNA、蛋白质等)。磁性纳米材料良好的超顺磁性使得其在样品的分离、纯化和富集等方面提供了很大的方便。

而关于适配体的概念是在1990年被首次提出，是指利用指数富集的配体进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)从特定的寡核苷酸库中筛选出对目标靶有特异性相互作用的寡核苷酸(DNA或RNA)。适配体具有高亲和性、可大量快速的合成、可针对性筛选以及稳定性高等优良特性。因此，其在药物研发、分析检测等多个领域都有着良好的应用前景。

由于双酚A在实际样品中含量较低，复杂的样品基底对分析过程会产生严重的干扰，因此在进行分析前，预处理是个很重要的过程。而目前常用的预处理方法也较为复杂、费时。磁纳米粒子根据其独特的超顺磁性，将磁纳米粒子功能化，即偶联DNA适配体，形成磁纳米粒子探针，用此探针对样品中的被检测物质进行分离和富集，能够有效的简化前处理流程，缩短检测时间。

发明内容

本发明的目的是提供一种检测双酚A的适配体功能化磁性纳米材料生物传感器，构建利用高效液相信号检测的新型传感器。

本发明的技术方案：一种适配体功能化磁性纳米材料磁分离双酚A的方法，其特征在于：磁纳米粒子的合成、适配体功能化的磁纳米粒子、适配体功能化的磁性生物传感器吸附目标物双酚A后通过高效液相检测。

本发明内容：

一种适配体功能化磁性纳米材料磁分离双酚A的方法，其特征在于：磁纳米粒子的合成、适配体功能化的磁纳米粒子、适配体功能化的磁性生物传感器吸附目标物双酚A，并洗脱后通过高效液相检测；具体步骤为：

(1)100nm磁纳米粒子的合成