[发明专利]一种卷枝毛霉DK1菌株及其应用有效
申请号: | 201510080721.2 | 申请日: | 2015-02-15 |
公开(公告)号: | CN104726346B | 公开(公告)日: | 2017-12-22 |
发明(设计)人: | 丁若垚;郁崇文;张兴群;原月梦;孔德枝;常慧 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;D01C1/04;D01C1/00;C12R1/785 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所31233 | 代理人: | 黄志达 |
地址: | 201620 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 毛霉 dk1 菌株 及其 应用 | ||
技术领域
本发明属于生物纺织技术领域,特别涉及一种卷枝毛霉DK1菌株及其应用。
背景技术
卷枝毛霉在土壤、粪便、禾草及空气等环境中存在。在高温、高湿度以及通风不良的条件下生长良好。卷枝毛霉的用途很广,可以产生果胶酶、木聚糖酶、漆酶、凝乳酶等。常用的毛霉主要有鲁氏毛霉和总状毛霉。腐生,广泛分布于植物残体、腐败有机物、动物粪便和土壤中。
在麻的初加工中,需要通过一种沤麻过程来预先处理部分胶质(主要是果胶和半纤维素)。沤麻过程实际上应用了传统的微生物技术,它是通过微生物和酶的协同作用缓慢地去除附着在纤维表面非纤维素胶质的过程。沤麻过程对麻纤维质量影响很大,常用的沤麻方式有雨露沤麻和酶法沤麻。
此外,纺织加工中,必须进一步经过煮炼脱胶,即去除果胶、半纤维素和木质素等非纤维素物质(统称为胶质),才能获得用于轻纺的纤维,实现其使用价值。目前,麻行业常用的煮练方法主要是化学方法和酶法脱胶,化学脱胶工艺耗能大,设备损耗大,且排放的废水无法循环利用,污染问题严重。酶法脱胶就是将脱胶菌培养到菌生长的衰老期后进行过滤或离心等处理,再用得到的粗酶液浸渍原麻。粗酶液可以将麻纤维中的果胶、半纤维素、木质素等物质分解转化为简单的低分子物质,从而完成麻纤维的脱胶过程。酶法脱胶工艺无需专用设备,快速高效,无污染,生产的精干麻质量好。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种卷枝毛霉DK1菌株及其应用,该菌株生长周期短,菌种不易被污染,处理成本低,处理后纤维质量好,处理环境温和,耐热性能好,无环境污染等优点;能够直接用于亚麻、黄麻、红麻和竹纤维脱胶,具有脱胶周期短,纤维分散率高,脱胶效率高。
本发明的一种卷枝毛霉DK1菌株,其ITS序列如SEQ ID NO:1所示。
根据ITS测序Blast及聚类分析结果,该菌与卷枝毛霉相似性为99%,结合生理生化试验结果和镜检分析,命名此菌株为卷枝毛霉(Mucor circinelloides)DK1菌株。ITS测序中,所采用的正向引物为:ITS1(5-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’)、反向引物为ITS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’),均为国际通用引物,由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。
本发明所采用的卷枝毛霉(Mucor circinelloides)DK1菌株,保藏单位名称:CGMCC中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,保藏号为CGMCC NO.10143,保藏日期为2014年12月15日。建议分类命名为:卷枝毛霉(Mucor circinelloides)。
本发明的一种卷枝毛霉DK1菌株的应用,所述菌株应用于沤麻制备亚麻、黄麻、红麻或竹纤维。
所述具体沤麻工艺包括:
(1)卷枝毛霉DK1菌株保存于PDA培养基,添加冻存缓冲液;
(2)在灭菌冷却后的PDA培养基中,接入步骤(1)所得的菌一环,在转速200~400rpm,30~40℃下摇瓶培养24~36小时;
(3)将摇瓶培养后的PDA培养基接种入亚麻、黄麻、红麻原麻或竹纤维发酵培养基,在转速200r/min、温度30℃条件下摇瓶培养24小时得到发酵菌液;
(4)准备沤麻池;
(5)将制备的发酵菌液使用喷淋法喷洒到亚麻、黄麻、红麻原麻或竹纤维上做沤麻处理,沤麻后制得供纺织制品用亚麻、黄麻、红麻或竹纤维,沤麻条件为自然温度,pH自然;喷淋法的工艺具体为每48小时向沤麻区域喷洒菌液8ml。
所述步骤(1)中的冻存缓冲液每100ml的配方为:磷酸二氢钾0.1g,磷酸氢二钾0.02g,柠檬酸钠0.06g,七水合硫酸镁0.03g,甘油12ml,加水定容至100ml,制得。
所述步骤(3)中的亚麻、黄麻、红麻原麻或竹纤维发酵培养基配方为:亚麻、黄麻、红麻原麻或竹纤维25g,以亚麻、黄麻、红麻原麻或竹纤维的质量为基准,氯化钾的质量分数为1%,磷酸氢二钾的质量分数为2%,硫酸镁的质量分数为1%,硫酸亚铁的质量分数为0.02%,硫酸铵的质量分数为10%,补水至5000ml定容。
本发明的一种卷枝毛霉DK1菌株的应用,所述菌株应用于对亚麻、黄麻、红麻或竹纱线的煮练。
所述煮练工艺包括:
(1)卷枝毛霉DK1菌株保存于PDA培养基,添加冻存缓冲液;
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