[发明专利]一种高精度1/4MS(含固定介质)培养基质的规模化制作方法无效
申请号: | 201510082605.4 | 申请日: | 2015-02-16 |
公开(公告)号: | CN104620991A | 公开(公告)日: | 2015-05-20 |
发明(设计)人: | 钱夕刚 | 申请(专利权)人: | 钱夕刚 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;A01G31/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 233102 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高精度 ms 固定 介质 培养 基质 规模化 制作方法 | ||
1.一种高精度1/4MS(含固定介质)培养基质的规模化制作方法,其特征在于,所述的方法中包括有准确计算、精确称量、先少后多地混合、密封、单独母液制备、启封使用等六个步骤。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的六个步骤具体操作如下:
①准确计算:将MS基本培养基所含的17种元素扩大1000倍,即盐酸硫胺素0.1g,二水钼酸钠0.25g,烟酸0.5g,盐酸吡哆醇0.5g,碘化钾0.83g,甘氨酸2g,硼酸6.2g,七水硫酸锌8.6g,四水硫酸锰22.3g,乙二胺四乙酸钠铁36.5g,肌醇100g,磷酸二氢钾85g,七水硫酸镁185g,二水氯化钙220g,硝酸铵825g,硝酸钾950g,琼脂粉5000g;2种元素六水氯化钴和五水硫酸铜扩大10000倍,即各0.25g;
②精确称量:按照①中计算的结果准确称量,尤其是要用万分之一天平准确称量各0.25g的六水氯化钴和五水硫酸铜;
③先少后多地混合:按照量的少多进行先后混合,即按照盐酸硫胺素,二水钼酸钠,烟酸,盐酸吡哆醇,碘化钾,甘氨酸,硼酸,七水硫酸锌,四水硫酸锰,乙二胺四乙酸钠铁,肌醇,磷酸二氢钾,七水硫酸镁,二水氯化钙,硝酸铵,硝酸钾,琼脂粉的顺序混合均匀,共计7242.78g;
④密封:将混合后的固体基质按照250g每瓶的要求分装于塑料容器中,并进行密封;
⑤单独母液制备:六水氯化钴和五水硫酸铜各称量0.25g,溶于1L蒸馏水中,配制成10000倍母液;
⑥启封使用:根据需要,每1L蒸馏水中加入准确称量的上述固体基质7.24g,加热待其完全溶解后加入100μL六水氯化钴和五水硫酸铜的单独母液,进而加入其它所需试剂即可。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,该高精密度培养基质的规模化制作方法具有以下特点,即不同批次的基质之间无计算误差;由于17种试剂都扩大了1000倍,2种试剂扩大了10000倍,不同批次的基质之间的称量误差极小,精密度高;理论上,由于固体基质每次为1000倍的使用量(以每次1L计算),即可以配制1000L的上述配方,液体母液每次仅需要100μL,批次内部不会出现因为使用不同厂家、不同时期的试剂而导致的人为误差;扩大后的固体基质为每250g密封于一个塑料容器中,可避免因天气、温度、水分等外界因素影响导致出现液体母液常见的沉淀、发霉等现象,而液体基质仅为两种元素的混合;扩大10000倍后精密度高;上述的诸多优点都为以该培养基为基质开展的后续试验,获得准确的试验结果奠定基础。
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