[发明专利]用于制备放射性免疫缀合物的方法

权利要求书

1.一种用于制备锕-225(Ac-225)放射性缀合物的方法，该方法包括以下步骤：

(a)在缀合反应混合物中，使螯合试剂与生物分子缀合，从而制备缀合的生物分子，

(b)纯化所述的反应混合物以便除去未缀合的螯合试剂，以及

(c)在大约37℃下，在螯合反应混合物中，使一个或多个Ac-225放射性核与所述的缀合的生物分子螯合，从而制备Ac-225放射性缀合物，

其中

所述螯合试剂是S-2-(4-异硫氰基苄基)-1,4,7,10四氮杂环十二烷四乙酸(p-SCN-Bn-DOTA)；

所述生物分子是林妥珠单抗HuM195；

所述Ac-225的放射活性是大约1mCi；

所述HuM195以大约1mg的量存在于所述缀合反应混合物中；且

所述Ac-225放射性缀合物的产率是至少84％。

2.权利要求1所述的方法，其中所述的在步骤(a)中的缀合包括在大约37℃下将所述的缀合反应混合物温育大约1.5小时。

3.权利要求1所述的方法，其中所述的在步骤(a)中的缀合包括在16℃至20℃下将所述的缀合反应混合物温育大约24小时。

4.权利要求1所述的方法，其中所述的纯化包括使所述的缀合反应混合物通过过滤器过滤以便纯化所述的缀合的生物分子。

5.权利要求1所述的方法，其中所述的缀合反应混合物包含碳酸氢盐缓冲剂。

6.权利要求1所述的方法，其中所述的缀合反应混合物包含磷酸盐缓冲剂。

7.权利要求1所述的方法，其中所述的缀合反应混合物的pH为8.0至9.2。

8.权利要求4所述的方法，其中所述的过滤是在HEPES缓冲剂中进行的。

9.权利要求4所述的方法，其中所述的过滤是在NaAc缓冲剂中进行的。

10.权利要求4所述的方法，其中所述的过滤包括分子量阻隔为至少10,000Da。

11.权利要求4所述的方法，其中所述的过滤包括分子量阻隔为至少20,000Da。

12.权利要求4所述的方法，其中所述的过滤包括分子量阻隔为至少40,000Da。

13.权利要求1所述的方法，其中所述的螯合反应混合物包含龙胆酸或抗坏血酸。

14.权利要求1所述的方法，其中所述的螯合反应混合物的pH为5.5至7.0。

15.权利要求1所述的方法，其中所述的在步骤(c)中的螯合包括将所述的一个或多个Ac-225放射性核与所述的缀合的生物分子温育大约1.5小时。

16.权利要求1所述的方法，进一步包括将终止螯合剂加入到所述的螯合反应混合物中的步骤。

17.权利要求16所述的方法，其中所述的终止螯合剂为二乙烯三胺五乙酸(DTPA)。

18.权利要求16所述的方法，进一步包括在加入所述的终止螯合剂的步骤之后在大约37℃下将所述的螯合反应混合物温育大约30分钟的步骤。