[发明专利]一种臭椿组培快繁殖方法

权利要求书

1.一种臭椿组培快繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：

 （1）外植体处理及消毒：选取健壮植株上切取带腋芽的萌檗枝条作为外植体，剪去叶片，切成3.0～5.0长的带有2～3个腋芽的节段先用洗衣粉水冲洗1～3h，再用毛刷刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除，然后用自来水冲洗1～3h后置于超净工作台中，先用75%乙醇消毒5～30s后用无菌水洗3～5次，再用0.1%升汞溶液消毒10～25min，用无菌水冲洗4～6次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用；

（2）腋芽诱导：将步骤（1）处理后萌檗枝条切成1.5～2.5cm小段并接种到诱导培养基上,先在25～28℃条件下全暗培养10～15天，然后置于每天光照10～12小时，光照强度为1500～3000lx，直至诱导形成丛生芽；

（3）增殖培养：将步骤（2）培养获得的嫩芽长至约2cm时切离并转入增殖培养基上进行继代培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养7～14天，然后置于每天光照12～16小时，光照强度为3000～5000lx，置于培养温度为25～28℃的条件下培养，多次反复切割进行继代培养，得到萌芽；

（4）生根培养：将步骤（2）或（3）过程获得的高度约为2.5～3.5cm的丛生芽芽分切接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养7～14天，然后置于每天光照14～16小时，光照强度为2000～3000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根；

（5）炼苗移栽：将步骤（4）获得的高约6～8cm的生根试管苗去瓶盖置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由营养土：沙土＝2:1混合成的基质,置于光照培养箱内培养，每天以1/2MS大量元素营养液给幼苗浇水，保持湿度,待幼苗成活后再移栽大田。

2.根据权利要求1所述的一种臭椿组培快繁殖方法，其特征在于步骤（2）所述的诱导培养基为：N₆+1～6mg/L6-BA+0.1～1mg/L NAA+0.01～0.5mg/L IBA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

3.根据权利要求1所述的一种臭椿组培快繁殖方法，其特征在于步骤（3）所述的增殖培养基为：N₆+0.1～1mg/LNAA+0.5～4mg/L 6-BA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

4.根据权利要求1所述的一种臭椿组培快繁殖方法，其特征在于步骤（4）所述的生根培养基为：1/2MS+1～5mg/L NAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。