[发明专利]一种红花钓钟柳的离体快速繁殖方法

权利要求书

1.一种红花钓钟柳的离体快速繁殖方法，其特征在于包括以下步骤：

 （1）丛生芽诱导：选取健壮红花钓钟柳植株一年生木质化带芽茎段作为外植体，剪去叶片，切成3.0～5.0cm长的带有2～3个腋芽的节段先用0.2%高锰酸钾溶液浸泡1～3h，再用软毛刷轻轻刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除，然后用自来水冲洗1～3h后置于超净工作台中，先用75%乙醇消毒5～30s后用无菌水洗3～5次，再用0.1%升汞溶液消毒5～15min，用无菌水冲洗4～6次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后接种到启动培养基进行诱导培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养1～5天，然后置于每天光照10～12小时，光照强度为1500～3000lx，直至诱导形成丛生芽;

（2）继代培养：将诱导培养得到的丛生芽切割成单个芽并竖直向接种于增殖培养基上进行继代培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养1～3天，然后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃的条件下培养，多次反复切割进行继代培养，以得到更多的丛生芽;

（3）生根诱导：将步骤（1）或（2）过程获得的高度约为1.5～2.5cm的丛生芽芽分切接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养1～3天，然后置于每天光照12～15小时，光照强度为2000～3000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根;

（4）炼苗移栽：将步骤（3）获得的高4cm以上的根系发达的试管苗培养瓶移出培养室,在室内放置3～5天后逐渐打开瓶盖于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入盛有田间土壤的营养杯中，以塑料薄膜覆盖5～10天后揭去，30天后统计成活率。

2.根据权利要求1所述的一种红花钓钟柳的离体快速繁殖方法，其特征在于步骤（1）所述的诱导培养基为：MS+1～3mg/L6-BA+0.01～0.5mg/L NAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

3.根据权利要求1所述的一种红花钓钟柳的离体快速繁殖方法，其特征在于步骤（2）所述的增殖培养基为MS+0.01～0.5mg/LNAA+1～3mg/L 6-BA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

4.根据权利要求1所述的一种红花钓钟柳的离体快速繁殖方法，其特征在于步骤（3）所述的生根培养基为：1/2MS+0.1～1mg/L NAA+0.1～1mg/L IBA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。