[发明专利]一种SCOS小鼠成模预判方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种SCOS小鼠成模预判方法。

背景技术

男性不育一直是困扰世界的医学难题，具有极强的社会意义。男性不育是多种因素引起的复杂的临床综合症，其中无精子症是男性不育的常见原因之一，而唯支持细胞综合征( Sertoli cell only syndrome，SCOS) 是无精子症中最为严重的一种病理类型。

白消安是一种经典的化疗药，可诱发精原细胞的一过性凋亡，严重可导致SCOS。白消安处理的小鼠SCOS模型是一种最为经典的无精子症动物模型。小鼠个体差异、白消安注射剂量等多种因素均可影响该模型的成模率。另一方面，在动物实验中，为研究SCOS发病机理，对SCOS小鼠的解剖工作需要在SCOS小鼠成模稳定之前进行。按已有研究成果，一般注射白消安以后4周左右的小鼠可以成模、稳定，而为研究SCOS的发病机理，一般在注射白消安2-3周即SCOS小鼠成模稳定前就需杀死小鼠解剖取生精小管进行观测。因此迫切需要一种方法可以预测小鼠注射白消安后生精小管是否可以在4周左右成模。也就是对于2-3周已经被用于SCOS发病机理研究的小鼠的生精小管，需要预测假设不杀死小鼠进行实验，而是继续饲养到白消安注射四周左右的情况下是否能够成模。

拉曼光谱是一种无标记激光检测技术，它可以提供物质化学组成和分子结构的相关信息，并反映在二维的拉曼光谱谱峰上。每一种物质都有其特殊的拉曼光谱，称为化学或生物“指纹”。因此，根据应用白消安构建唯支持细胞综合征小鼠动物模型的生物机理，可以通过特定化学物质寻找一些特定的拉曼光谱谱峰进行SCOS小鼠生精小管成模的预测，即对于2-3周已经被用于SCOS发病机理研究的小鼠的生精小管，预测假设不杀死小鼠进行实验而在饲养到4周的时候是否能够成模。

发明内容

本发明提供了一种SCOS小鼠成模预判方法，能够预测在不对小鼠进行手术的前提下生精小管是否能够成模。

本发明提供一种SCOS小鼠成模预判方法，步骤如下：

（1）获取小鼠样本拉曼光谱特征：以较大剂量注射白消安，饲养小鼠四周后，获取小鼠样本生精小管拉曼光谱特征；

（2）获取生精小管拉曼光谱特征谱峰向量样本库；

（3）SCOS动物实验中的小鼠注射白消安2-3周后，处死小鼠获取拉曼光谱特征；

（4）获取SCOS动物实验中小鼠的生精小管拉曼光谱特征谱峰；

（5）根据特征谱峰向量样本库分析SCOS动物实验中小鼠的生精小管拉曼光谱特征谱峰，预测在不对小鼠进行手术的前提下生精小管是否能够成模。

优选地，步骤（2）和步骤（4）所述特征谱峰的范围为1500cm^-1—3500cm^-1。

应用本发明方法采用留一法进行检测，对于正常小鼠的预测正确率达到60%以上，对于SCOS小鼠的预测正确率达到90%以上。显然，不采用留一法，建立更大的生精小管谱峰向量样本库必然进一步提高正确率。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。

实施例1

本发明的SCOS小鼠成模预判方法分为4个步骤：

1、获取小鼠样本拉曼光谱特征

1.1 以较大剂量注射白消安，饲养小鼠，同时饲养一批未处理的正常小鼠作为对照样本；

1.2 注射白消安饲养四周后，处死小鼠，摘取睾丸；

1.3 对睾丸进行固定、切片、染色；

1.4 将SCOS小鼠和正常小鼠生精小管进行游离、分离，每只小鼠取多根生精小管上n个点的拉曼光谱。n根据实际需要进行选取，一般选择3-5。

2 、获取生精小管拉曼光谱特征谱峰向量样本库

2.1 对每根生精小管n个点观测到的拉曼光谱进行处理（取多点平均值、多点中最大值减去最小值、多点平均值等）；

2.2 对处理后的拉曼光谱特定的谱峰段进行提取；特征谱峰的范围在1500cm^-1—3500cm^-1；2.3 在上述特征谱峰段提取m个谱峰点的值，构成谱峰向量；m可根据实际需要选取，一般选择5-20；

2.4 根据每根生精小管对应小鼠的情况，建立包括SCOS小鼠和正常小鼠的生精小管特征谱峰向量样本库。

3、动物实验中获取生精小管拉曼光谱