[发明专利]蛔虫粪抗原检测

说明书

本申请是基于申请日为2008年6月12日，优先权日为2007年6月15日，申请号为200880102765.9(PCT/US2008/007363)，发明名称为“蛔虫粪抗原检测”的专利申请的分案申请。

发明领域

本发明涉及用于检测动物中的蛔虫(roundworm)的组合物、装置、试剂盒和方法。更具体地，本发明涉及用于检测粪便样品中是否存在蛔虫的组合物、装置、试剂盒和方法。甚至更具体地，本发明涉及用于检测粪便样品中是否存在蛔虫抗原的抗体组合物、装置、试剂盒、和方法，所述粪便样品可能还包括一种或多种钩虫(hookworm)、鞭虫(whipworm)、和犬心虫(heartworm)抗原。

发明背景

肠蛔虫感染在动物中是常见的，并且如果放任不进行治疗，能引起严重的疾病，甚至死亡。虽然诊断感染蛔虫的动物为患有一些类型的寄生蠕虫(worm)(肠虫(helminth))感染是相对容易的，但是鉴定蛔虫具体为致病蠕虫是显著更困难的。这是一个难题，因为在受感染动物的护理人员具有蛔虫是感染的特定来源的知识时，蛔虫感染是最好治疗的。例如，此类知识容许护理人员用对蛔虫有最佳效力的药物治疗动物，因此避免使用通常有效针对寄生虫感染、但对蛔虫不具最佳效果的药物或药物混合物。

用于诊断蛔虫感染的当前方法主要涉及对粪便样品的显微镜检查，其或是直接在粪便涂片中或是在通过密度介质中的浮选来浓缩卵和寄生物后进行。尽管此规程被高度采用，但是该方法具有显著的缺点。这些显微术方法是费时的，要求专门的仪器，并且具有低的特异性。另外，这些方法的结果的准确性高度依赖于操作人员的技术和专长。

一般而言，也可以如下在分子水平进行分类学区别，即测定动物中是否存在针对特定蠕虫物种或规定的蠕虫物种组的一种或多种抗体的一种或多种抗原。例如，Hill等(Veterinary Parasitology(1997),第68卷,第91页-第102页)披露了一种酶联免疫吸附测定法(ELISA)测试，其用于在来自猪动物的血清中检测对鞭虫特异性的抗体。虽然Hill等的测试不与来自感染有蛔虫或钩虫的猪的血清起交叉反应，但是尚未确定该测试是否与来自感染有犬心虫的猪的血清起交叉反应。类似地，Yamasaki等(J.Clin.Microbiology(2000),第38卷,第1409页-第1413页)披露了一种ELISA测试，其利用重组蛔虫抗原来检测人血清中对蛔虫特异性的抗体。尽管Yamasaki等的测定法已经显示了不与钩虫或犬心虫起交叉反应，但是尚未确定其是否与鞭虫起交叉反应。Bungiro和Cappello(A.J.Trop.Med.Hyg.(2005),第73卷,第915页-第920页)披露了一种ELISA以检测实验仓鼠模型系统中由钩虫斯里兰卡钩口线虫(Ancylostoma ceylanicum)引起的感染，但是尚未确定他们的测试是否还与蛔虫、鞭虫和犬心虫中的一种或多种起交叉反应。

临床医生对使用这些测定法来诊断感染蠕虫的动物显示出很少的兴趣。尚不采用这些测定法的一个原因在于研究人员尚未证明它们中的任一种能够特异性检测特定类型的蠕虫而排除所有其它主要类型的蠕虫。例如，还没有人开发出如下测定法，其特异性检测蛔虫，而且还已经显示出不与钩虫、鞭虫和犬心虫起交叉反应。这种没有将动物的感染指向单一来源的能力会造成诊断的不确定，因此可能会导致次佳治疗的施用。

此外，这些测定法中的一些仅已经显示出对于检测血清样品中的抗原或抗体是有用的。这是限制性的，因为从患病动物获得血清样品经常是不切实际的或者是困难的。例如，在不配合的动物的情况中，为了抽取血液的目的而使动物稳定可能是有困难的，而在生病严重的动物的情况中，为了相同目的而将动物运输至临床医生的诊所可能是不切实际的。因此，使用如下动物材料能更好地实施测试是否存在特定的蠕虫类型，所述动物材料能容易获得，而且不需要运输动物，诸如粪便。存在于粪便样品中的抗原称为粪抗原。在作为本发明主题的寄生虫抗原的情况中，粪抗原是存在于宿主动物的粪便样品中的蠕虫抗原。

这些测定法中的一些的另一项固有限制在于它们涉及特定重组抗原的生成和纯化。具体地，由于生成和纯化此类抗原所需要的步骤可以是昂贵且费时的，所以这是限制性的。

因此所需要的是用于检测粪便样品中是否存在蛔虫的组合物、装置、试剂盒和方法。所需要的组合物、装置、试剂盒、和方法应当进一步能够特异性检测粪便样品中是否存在蛔虫，所述粪便样品含有钩虫、鞭虫、和犬心虫中的一种或多种。

发明概述