[发明专利]耐氧夏普氏菌及其在达维荚蒾苷元有氧合成中的应用有效
| 申请号： | 201510094048.8 | 申请日： | 2015-03-03 |
| 公开（公告）号： | CN104673721B | 公开（公告）日： | 2018-04-24 |
| 发明（设计）人： | 王秀伶;杨露;彭文涛;王铭 | 申请（专利权）人： | 河北农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12P7/22;C12R1/01 |
| 代理公司： | 石家庄国为知识产权事务所13120 | 代理人： | 李荣文 |
| 地址： | 071001 *** | 国省代码： | 河北;13 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 夏普 及其 达维荚蒾苷元 有氧 合成 中的 应用 | ||
1.一种耐氧夏普氏菌（sharpea sp.）Aeroto-AUH-JLD21在达维荚蒾苷元有氧合成中的应用，所述的耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21保藏号为CGMCC No.9976。
2.根据权利要求1所述的耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21在达维荚蒾苷元有氧合成中的应用，其特征在于包括以下步骤：
（1）耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21的培养
将低温冷冻保存的耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21融化并按10～15%接种量接种到添加0.05%L-半胱氨酸的新鲜BHI液体培养基中，在37℃恒温培养箱内活化培养24 小时；再以10%接种量将上述活化后的耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21转接到新鲜的BHI液体培养基中，培养4～8小时作为种子液；
（2）底物甘草素与耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21共培养
将上述耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21的种子液转接到发酵培养基中，同时加入甘草素进行共培养；
（3）代谢产物达维荚蒾苷元的分离纯化。
3.根据权利要求2所述的耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21在达维荚蒾苷元有氧合成中的应用，其特征在于所述步骤（2）中将耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21的种子液按10～15%接种量转接到发酵培养基中，同时加入母液浓度为40～60毫摩尔/升的底物甘草素，使甘草素在培养基中的终浓度为1.6～2.0毫摩尔/升，在37℃恒温培养箱内培养2～3天；所述发酵培养基为添加5.93克/升NaH2PO4和22.21克/升Na2HPO4的BHI液体培养基，pH值为7.0～7.3。
4.根据权利要求2所述的耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21在达维荚蒾苷元有氧合成中的应用，其特征在于所述步骤（2）中将耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21的种子液按15～20%接种量转接到发酵培养基中，同时加入母液浓度为40～60毫摩尔/升的底物甘草素，使甘草素在培养基中的终浓度为1.2～1.4毫摩尔/升，在37℃恒温培养箱内培养2～3天；所述发酵培养基的配方为7.5克/升葡萄糖、10克/升蛋白胨、1.2克/升L-半胱氨酸、10克/升氯化钠，调节pH值为7.0，再向其中加入3.59克/升NaH2PO4，27.58克/升Na2HPO4。
5.根据权利要求2所述的耐氧夏普氏菌Aeroto-AUH-JLD21在达维荚蒾苷元有氧合成中的应用，其特征在于所述步骤（3）中分离纯化方法为：用等体积的乙酸乙酯萃取发酵液2次，将萃取液合并后过滤、蒸干，加入100%甲醇溶液，用制备柱在HPLC上进行分离得到代谢产物达维荚蒾苷元。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于河北农业大学，未经河北农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510094048.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
