[发明专利]抗人IL-17单克隆抗体

说明书

本发明公开了一种利用噬菌体抗体库技术筛选并利用基因工程方法制备的新型抗人IL‑17的单克隆抗体或其片段，其特征在于对人IL‑17具有高亲和力。本发明抗体可以是全长抗体、基本上完整的抗体、Fab片段、F(ab')2片段或单链Fv片段。该单克隆抗体或其片段用于治疗由人IL‑17介导的自身免疫系统疾病中的用途，所述的自身免疫系统疾病包括但不局限于银屑病、类风湿性关节炎或强直性脊柱炎。本发明并且公开了包含编码该单克隆抗体或其片段的核苷酸载体、宿主细胞、制备和纯化方法。

技术领域

本发明为基因工程抗体药物领域，特别是抗人IL-17的单克隆抗体领域。本发明涉及人源性功能性抗人IL-17单克隆抗体，以及这类抗体在治疗人IL-17介导的疾病中的用途。

背景技术

白细胞介素17(IL-17)家族目前包括IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E和IL-17F六种细胞因子。IL-17家族的成员与任何其它已知的细胞因子没有序列相似性，而且家族成员之间的序列相似性也比较低(Gaffen SL,Nat.Rev.Immunol.2009Aug；9(8):556-67)。 IL-17家族成员的功能主要是参与免疫应答的调节。白细胞介素IL-17A(以下简称IL-17)是 20-30kD的同源二聚体糖蛋白,其主要由活化的CD4+T细胞产生并作为促炎细胞因子起作用。IL-17由活化的T细胞在炎性位点分泌,而不在体循环中分泌。IL17具有多种生物学特性,包括上调黏附分子并在多种细胞类型包括滑膜细胞、软骨细胞、成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞、角质形成细胞和巨噬细胞中诱导产生大量炎性细胞因子和趋化因子。同样，IL-17通过诱导趋化因子的释放诱导嗜中性粒细胞聚集到炎性位点上，刺激前列腺素和金属蛋白酶的产生，并抑制蛋白聚糖的合成。此外，IL-17在造血祖细胞的成熟中起重要作用。IL-17在不同的器宫和组织包括肺、关节软骨、骨、脑、造血细胞、肾、皮肤和肠中具有信号转导功能。因此，由IL-17A/Th17介导的免疫反应是全身性的，由此引发的炎症反应主要表现为中性粒细胞浸润。

大量的研究已经证实IL-17的增加与多种疾病有关，包括呼吸道炎症、类风湿性关节炎 (RA)、骨关节炎、骨侵蚀、腹膜内脓肿与粘连炎症(IBD)、同种异体移植排斥、牛皮癣、某些类型的癌、血管发生、动脉粥样硬化和多发性硬化(MS)等(Witkowski等人，Cell.Mol.Life Sci.61:567-579,2004)。而且，IL-17在胶原基质分解、炎症及关节损伤等方面与IL-1b具有相对独立的效应，而且IL-17具有与TNF-a协同扩大炎症的生物学效应。进一步的研究证实，通过结合IL-17的特异性抗体或可溶性IL17受体阻断IL-17的体内生物学活性时，可以有效减少了多种动物关节炎模型中的炎症和骨侵蚀。因此，IL-17成为治疗 RA和其它自身免疫性疾病的新靶标，而且由于IL17主要集中于炎症部位，因而靶向IL17 的药物可能较靶向其它参与体循环的促炎细胞因子(如TNF)等具有潜在的更高安全性。

目前欧盟和美国FDA都已经批准用Novartis公司的Cosentyx治疗中重度斑块状银屑病成人患者，而Cosentyx的活性成分 是secukinumab，是一种IL-17的单抗。但是本领域仍然需要更多适于治疗患者的改善的抗IL-17抗体。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型抗人IL-17的单克隆抗体或其片段，编码该单克隆抗体或其片段的多核苷酸的载体、宿主细胞、制备和纯化该抗体的方法及临床应用。由本发明涉及的抗体基因可变区的序列，可构建全长的抗体分子作为药物用于临床上由人IL-17介导的自身免疫系统疾病使用。这些适应症包括但不局限于下列：银屑病、类风湿性关节炎或强直性脊柱炎。

本发明构建了大容量的天然人源噬菌体抗体库，从中筛选得到了全人源抗IL-17单克隆抗体。

本发明的抗体为全人源的单克隆抗体，拮抗至少一种与IL-17或其部分相关的体外或体内生物活性。