[发明专利]一种含有能够降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒

说明书

本发明提供了一种含有能够降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒。所述含有降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒由菌株羽扇豆苍白杆菌Ochrobactrum lupini DW3的菌液经过提取与纯化得到的。向加入苯并[ghi]苝及基础培养基、微量金属液和维生素c溶液的玻璃瓶内接种菌株羽扇豆苍白杆菌Ochrobactrum lupini DW3，培养20天后得到菌液，对菌液经过提取与纯化得了到含有降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒。本发明得到的含有降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒可以构建对苯并[ghi]苝具有降解功能的菌株，提高以苯并[ghi]苝为代表的多环芳烃污染物的生物降解效果，对于多环芳烃苯并[ghi]苝污染土壤及水体有应用潜力。

技术领域

本发明属于微生物学与分子生物学技术领域，具体涉及一种含有能够降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒。

背景技术

多环芳烃(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，PAHs)是一类含有两个或两个以上苯环的有毒有机污染物，具有强烈的致癌作用、致畸作用和致突变作用。PAHs能通过生物累积及食物链的传递作用对生态环境和人体健康造成极大危害，已引起各国环境科学家的高度重视。对环境中多环芳烃的治理技术主要有物理法、化学法和生物法，其中生物法具有操作简单、运行费用低、无二次污染等优点。一般来说，随着多环芳烃苯环数量的增加，其降解速率降低。低分子量的多环芳烃在环境中能较快被降解，在环境中存在的时间较短，而高分子量的多环芳烃，例如芘、荧蒽、苯并[a]芘、苯并[ghi]苝、茚并[1，2，3-cd]芘、苯并[b]荧蒽及苯并[k]荧蒽等则难于降解，较长期存在于环境中。因此，构建多环芳烃高效降解菌来强化降解已成为去除多环芳烃污染的一种重要方法。

多环芳烃降解质粒是细胞内能够自我复制的双链环状的小分子DNA，能降解芳香族化合物的代谢酶通常是由降解质粒基因编码的。因此，多环芳烃降解质粒上携带了部分的降解基因信息，可通过转化作用连接到宿主细菌中构成重组菌，从而使重组菌表现相应的降解多环芳烃的性能。从多环芳烃降解菌株中提取与纯化得到多环芳烃降解质粒对于构建新的多环芳烃高效降解菌以及提高多环芳烃的降解性能都具有重要的意义。但是，国内外缺少关于多环芳烃降解质粒方面的研究报道。

发明内容

本发明提供一种含有能够降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒。所述含有降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒由菌株羽扇豆苍白杆菌Ochrobactrum lupini DW3的菌液经过提取与纯化得到的。提取与纯化含有降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒所用的菌株羽扇豆苍白杆菌Ochrobactrum lupini DW3，2013年12月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，该中心位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC No.8623。

从菌株羽扇豆苍白杆菌Ochrobactrum lupini DW3中提取与纯化含有降解苯并[ghi]苝功能基因的质粒的具体方案为：