[发明专利]一种聚球藻的无菌收集方法有效
申请号: | 201510101558.3 | 申请日: | 2015-03-09 |
公开(公告)号: | CN104673673B | 公开(公告)日: | 2018-04-24 |
发明(设计)人: | 孙溢华;张正阳;施定基;何培民;徐文婷;贾睿;贾晓惠 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12R1/89 |
代理公司: | 上海伯瑞杰知识产权代理有限公司31227 | 代理人: | 吴瑾瑜 |
地址: | 201306 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 聚球藻 无菌 收集 方法 | ||
1.一种聚球藻的无菌循环收集方法,其步骤包括:
(1)、将密度为0.8-1.2g/L的初始聚球藻液从光生物反应器中转移至聚球藻无菌收集装置中避光、密封保存,以1.5℃/分钟的平均降温速度,将藻液的温度降至6-8℃;
(2)、在聚球藻液中加入2mol/L的氢氧化钠溶液作为pH调节剂并以150-200rpm的速度搅拌,将聚球藻液的pH值调节至10-10.5;将藻液再次降温至6-8℃,平均降温速率为1.5℃/分钟,保存8-15分钟;
(3)、从聚球藻无菌收集装置的出样口收集聚球藻浓缩液;
(4)、排出聚球藻上清液,每升上清液中加入1g NaNO3、0.02g K2HPO4·3H2O、0.2g Na2CO3、0.006g柠檬酸铁铵、0.018g CaCl2·2H2O、0.001g Na2CO3、0.03mg MgSO4·7H2O、0.1mg ZnSO4·7H2O、0.9mg MnCl2·4H2O、0.15mg Na2MoO4·2H2O、1.5mg H3BO3、0.025mg Ca(NO3)2·6H2O、0.04mg CuSO4·5H2O,用质量浓度为10%的盐酸将其pH值调节至7-7.5,加入光生物反应器中培养10-30小时后,密度达到0.8-1.2g/L,将光生物反应器中的10-20%的藻液转入聚球藻无菌收集装置中循环收集;
(5)、重复步骤(1)-(4);
所述聚球藻为Synechococcus sp.PCC 7002。
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