[发明专利]一种利用TALEN技术构建可敲除小鼠CRAMP基因质粒的方法在审
| 申请号： | 201510102677.0 | 申请日： | 2015-03-09 |
| 公开（公告）号： | CN104694539A | 公开（公告）日： | 2015-06-10 |
| 发明（设计）人： | 李冬;吴军录;权文强 | 申请（专利权）人： | 上海市同济医院 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/85;C12N15/55;C12N15/12;C12N5/10;A01K67/027 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 金重庆 |
| 地址： | 200065 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 talen 技术 构建 小鼠 cramp 基因 质粒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.用于定向敲除鼠源性细胞CRAMP基因的TALEN识别序列对，其特征在于，所述TALEN识别序列对由左臂识别序列和右臂识别序列组成；所述左臂识别序列如SEQ ID NO.9所示；所述右臂识别序列如SEQ ID NO.12所示。
2.利用权利要求1所述的识别序列构建的小鼠CRAMP基因敲除的载体质粒，其特征在于，所述的载体质粒包括TALEN L链和TALEN R链。
3.根据权利要求2所述的小鼠CRAMP基因敲除的载体质粒，其特征在于，所述的TALEN L链是由SEQ ID NO.1所示序列的碱基编码；所述的TALEN R链是由SEQ ID NO.2所示序列的碱基编码。
4.权利要求3所述的载体质粒在定向敲除鼠源性细胞的CRAMP基因，构建CRAMP基因敲除的小鼠中的应用。
5.一种内源性CRAMP基因敲除的细胞的制备方法，其特征在于，将权利要求3所述的编码TALEN L链和编码TALEN R链的核苷酸序列分别插入原核表达载体中，转染入含有内源性的CRAMP基因的细胞中以敲除CRAMP基因，从而获得内源性CRAMP基因被敲除的细胞。
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